http://hdl.handle.net/10366/143123 2026-05-01T23:06:36Z http://hdl.handle.net/10366/170989 [ES] Durante los últimos años las infecciones fúngicas invasivas (IFI) han adquirido una importancia creciente en el ámbito hospitalario. En muchas ocasiones se presentan como infecciones oportunistas y comportan una elevada morbimortalidad, especialmente en algunos grupos de pacientes inmunodeprimidos como aquellos con enfermedades oncohematológicas, autoinmunes e inflamatorias, o los receptores de trasplantes de progenitores hematopoyéticos y de órgano sólido. Aunque los avances en la terapéutica han permitido disminuir de forma muy significativa la mortalidad y mejorar la calidad de vida, han supuesto un incremento del número de pacientes susceptibles al desarrollo de una IFI (1). La mejora de los métodos diagnósticos, microbiológicos y no microbiológicos (tomografía computarizada de alta resolución, galactomanano, betaglucano, etc.) ha contribuido al aumento del número de casos diagnosticados, así como a un diagnóstico más precoz. Esto, junto con la introducción de nuevos antifúngicos ha permitido que el pronóstico de las IFI haya mejorado en los últimos años (2). No obstante, estas infecciones continúan siendo un reto para los clínicos. Esta tesis tiene como objetivo la implantación en la práctica clínica de un programa de monitorización farmacocinética de antifúngicos del grupo de los triazoles en pacientes que reciben estos fármacos como profilaxis o tratamiento de IFI permite optimizar el tratamiento, aumentando la eficacia y reduciendo la toxicidad. Las decisiones terapéuticas basadas no sólo en la respuesta clínica y microbiológica, sino también en los resultados de la TDM de triazoles, contribuyen a mejorar los resultados clínicos a corto y largo plazo. 2026-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/170753 [EN] The pharmaceutical industry is considered one of the industries with the largest carbon footprint. Concern about the impact of the chemical industry on the environment gave rise to a movement now known as Green Chemistry or Sustainable Chemistry. Its goal is to move from traditional methods, which focus on chemical yields, to cleaner methods and alternatives. Many of the chemical processes used to produce pharmaceuticals still rely on traditional synthetic methods. The application of more sustainable methods is of particular interest for the synthesis of structures with bioactivity, such as quinolines. Quinoline is a structural unit present in natural and pharmaceutical products. Since its discovery in the 19th century, numerous medicinal properties have been described for compounds with a quinoline skeleton. First against malaria and then against many other diseases, such as other parasitic and bacterial infections, HIV and cancer. Consequently, many synthetic methods have been developed to obtain the quinoline ring as well as its subsequent application in other strategies to improve its biological activity, such as hybridization. Hybridization, used in medicinal chemistry, allows combining several bioactive chemical structures by means of connectors or spacers in a single molecule and is used with the aim of improving their pharmacological properties. In previous projects, the research group applied this strategy in the synthesis of hybrid compounds of naphthohydroquinones and podophyllotoxin. The subsequent biological evaluation of these compounds showed good results against cancer. In this thesis the synthesis of quinolines, such as 4-carboxyquinolines, with possible bioactivity against diseases like cancer, was proposed using methods that are in accordance with the principles of green chemistry. Thus, this project focused on the following aspects of green chemistry: use of less toxic solvents and reagents, atomic efficiency, multicomponent synthesis and use of catalysts. The obtained quinoline compounds were used to prepare new hybrid-type compounds with a naphthohydroquinone. The naphthohydroquinone moiety was synthesized based on the method previously optimized by the group from myrcene and p-benzoquinone. The two moieties were then linked through several linkers with ester bonds using a,w-dibromo-reagents or with amide bonds using diamines. Aiming to obtain new hybrid compounds, it was also explored the synthesis of bisquinolines, both symmetrical and asymmetrical. In addition, in this work, a new research line was opened in the group with the long-term objective of a possible application of dextran-quinoline conjugates in controlled and targeted drug delivery systems. Different binding methods between the obtained quinolines and dextran were evaluated, and it was obtained one of these quinoline-dextran conjugates. The obtained hybrid compounds and their precursors were further evaluated considering their biological activity. Antioxidant properties were evaluated using the DPPH method, where one hybrid compound showed better results than its precursors. Cytotoxic activity was carried out using MTT method against HT-29, H460 and MCF-7 cell lines. It was observed that hybridization improves the compounds activity, since all compounds showed cytotoxicity in the order of μM for at least one cell line. ADME prediction of the most promising compounds allowed to conclude that, in general, compounds from the same family present the same pharmaceutical characteristics. In summary, in this thesis it has been possible to obtain 4-carboxyquinolines by a new method. The obtained quinolines were used to synthesize quinoline-naphthohydroquinone hybrid compounds and bisquinolines, as well as, for exploring the possibility of dextranquinolines conjugates. In the subsequent biological evaluation, hybrid compounds have presented not only better antioxidant capacity but also an improvement in activity against the tested cell lines, showing hybridization as a good strategy to improve pharmacological properties. 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/169557 [EN] Potentially inappropriate medication (PIM) use among older adults is a widespread challenge associated with increased adverse drug events, hospitalizations, and healthcare costs. This thesis addresses the development, implementation, and evaluation of a multifaceted intervention combining educational strategies with a digital tool, APIMedOlder, aimed at reducing PIM prescription in older patients within primary care settings in Portugal. Initially, a systematic review of 47 studies identified effective interventions to reduce PIM, highlighting that medication review was most effective in hospital settings, whereas educational strategies yielded better results in primary care. A complementary review on barriers and facilitators to digital health tool adoption identified key factors affecting healthcare professionals engagement, including training needs, time constraints, ease of use, and workflow integration. A retrospective study comparing established PIM criteria in 1200 Portuguese older adults revealed high PIM prevalence and poor concordance between criteria, emphasizing the complexity of medication management in this population. The APIMedOlder web application was developed based on the EU(7)-PIM list and assessed for usability by a multidisciplinary group of healthcare professionals, achieving high satisfaction scores and positive feedback regarding its ease of use. Over one year, usage data recorded 400 searches predominantly by pharmacists and physicians, with a significant proportion related to PIM, indicating growing awareness and engagement. Focus groups with 37 general practitioners revealed five main themes: factors associated with polypharmacy, challenges in deprescribing, problems related to PIM, strategies to manage polypharmacy, and barriers and facilitators to adopting digital tools for medication optimization. Participants highlighted time constraints, limited integration of tools, and inconsistent application of PIM criteria as key challenges, reinforcing the need for accessible and integrated solutions like APIMedOlder to support clinical decision-making. Finally, a nonrandomized cluster-controlled intervention involving educational sessions and APIMedOlder use suggested a modest short-term reduction in PIM prescribing to older adults by general practitioners, though long-term sustainability appeared limited. These findings underscore the necessity of continuous educational support, system integration, and addressing practical barriers to achieve lasting improvements. Overall, this research demonstrates that combining targeted educational interventions with user-friendly digital tools offers a promising and scalable approach to enhancing prescribing safety in older adults. Recommendations include integrating APIMedOlder into electronic health record systems, providing ongoing training, and evaluating clinical outcomes over longer periods. Future studies should also explore patient perspectives and leverage emerging technologies to further personalize and optimize medication management in geriatric care. 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/167226 [EN] The sustainable and appropriate use of natural resources has become a growing global concern, driving the study of plant species and the implementation of sustainable strategies for efficient and environmentally responsible agricultural management. Within this context, agronomic and nutritional strategies play a crucial role in determining the chemical quality and bioactive properties of natural matrices. A deep understanding of these strategies is fundamental for identifying and implementing sustainable and effective agricultural practices, applicable across various production and environmental contexts. The physiological and morphological responses of plants to different agronomic and nutritional factors are complex and vary considerably among species. Such factors can significantly influence both primary and secondary plant metabolites, directly affecting the chemical composition and bioactivity of the developed extracts. In this regard, the central objective of this work was to comprehensively evaluate the specific effects of different agricultural practices and nutritional regimens on the chemical composition and bioactive properties of plants recognized for their nutritional functionality and bioactive potential, as well as to explore the potential of nonconventional food plants in developing innovative products, create edible coatings enriched with natural extracts for post-harvest preservation, and formulate plant-based beverages enhanced with natural bioactive compounds. To achieve these objectives, the study was structured into four main tasks.; [ES] El uso sostenible y apropiado de los recursos naturales se ha convertido en una preocupación mundial creciente, lo que ha impulsado el estudio de especies vegetales y la implementación de estrategias sostenibles para una gestión agrícola eficiente y ambientalmente responsable. En este contexto, las estrategias agronómicas y nutricionales desempeñan un papel crucial en la determinación de la calidad química y las propiedades bioactivas de las matrices naturales. Una comprensión profunda de estas estrategias es fundamental para identificar e implementar prácticas agrícolas sostenibles y eficaces, aplicables en diversos contextos de producción y medioambientales. Las respuestas fisiológicas y morfológicas de las plantas a diferentes factores agronómicos y nutricionales son complejas y varían considerablemente entre especies. Tales factores pueden influir significativamente en los metabolitos primarios y secundarios de las plantas, afectando directamente la composición química y la bioactividad de los extractos obtenidos. En este sentido, el objetivo central de este trabajo fue evaluar de forma integral los efectos específicos de diferentes prácticas agrícolas y regímenes nutricionales sobre la composición química y las propiedades bioactivas de plantas reconocidas por su funcionalidad nutricional y su potencial bioactivo, así como explorar el potencial de plantas alimenticias no convencionales para el desarrollo de productos innovadores, crear recubrimientos comestibles enriquecidos con extractos naturales para la conservación poscosecha, y formular bebidas vegetales enriquecidas con compuestos bioactivos naturales. Para alcanzar estos objetivos, el trabajo se estructuró en cuatro bloques principales. 2025-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/165780 [ES]El trabajo llevado a cabo en la presente Tesis doctoral muestra que es posible obtener y estabilizar la vitamina D2 natural de los hongos e incorporarla a una matriz de harina utilizando tecnologías innovadoras de extracción, irradiación y encapsulación. Por otra parte, con el fin de maximizar los compuestos bioactivos presentes en los hongos, se ha realizado un estudio para complementar los sustratos donde se cultivan los hongos con silicato de calcio. Esta suplementación se ha relacionado con una mayor resistencia contra las plagas de insectos. Sin embargo, pocos estudios muestran el impacto de esta suplementación en los diferentes parámetros agronómicos de los hongos de ostra (Pleurotus ostreatus var. florida) o incluso su composición química y bioactividad (actividades antioxidantes, antibacterianas y antifúngicas).; [EN]As a result, in order to maximize the bioactive compounds, present in mushrooms, a study has been done to supplement mushroom substrates with calcium silicate. This supplementation has been linked to increased resistance against insect pests. However, few studies show the impact of this supplementation on the different agronomic parameters of oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus var. florida) or even their chemical and bioactive composition (antioxidant, antibacterial and antifungal activities). 2022-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/164306 [ES]El interés de esta investigación radica en la evaluación integral de los compuestos fenólicos presentes en frutos andinos como el mortiño (Vaccinium floribundum Kunth) y la mora andina (Rubus glaucus Benth), destacando su potencial como fuentes naturales de agentes bioactivos con propiedades antioxidantes y beneficios funcionales para la salud humana. Estos frutos, provenientes de ecosistemas de alta montaña presentan una elevada acumulación de metabolitos secundarios debido a las condiciones ambientales extremas, como la exposición intensa a radiación ultravioleta (UV), temperaturas fluctuantes y bajas concentraciones de oxígeno. Estas condiciones de estrés abiótico son conocidas por inducir la expresión de rutas metabólicas secundarias relacionadas con la síntesis de compuestos fenólicos, especialmente flavonoides y antocianos, compuestos con demostrada capacidad antioxidante y efectos biológicos en modelos experimentales y estudios epidemiológicos (Manach et al. 2004). Un aspecto central de este trabajo es analizar cómo la altitud y el grado de madurez de los frutos modulan su composición química y su actividad biológica. La altitud ha sido ampliamente documentada como un factor determinante en la acumulación de antocianos y otros polifenoles, dado que las plantas cultivadas a mayores alturas están sujetas a mayor radiación UV-B, lo que estimula la actividad de enzimas clave en la biosíntesis de flavonoides (Zhang et al. 2022). De manera complementaria, el grado de madurez de los frutos influye en la concentración y distribución de metabolitos secundarios, ya que durante la maduración se producen cambios en el perfil fenólico, con un aumento en la acumulación de antocianos y una disminución de metabolitos precursores (Wang et al. 2014). Este trabajo persigue caracterizar estas variaciones para comprender cómo las condiciones ambientales y fisiológicas afectan el potencial bioactivo de estos frutos. La investigación también tiene un enfoque en el estudio de los mecanismos moleculares subyacentes a la actividad biológica de los compuestos fenólicos, utilizando para ello el organismo modelo Caenorhabditis elegans. Este nematodo es ampliamente reconocido por su alta conservación de rutas metabólicas y Interés y Objetivos genéticas respecto a mamíferos, incluyendo la vía de señalización de insulina/IGF-1, que regula procesos fundamentales como el estrés oxidativo, la longevidad y la resistencia celular (Ayuda-Durán et al. 2020). Mediante este modelo se intentará evaluar si los compuestos fenólicos, modulados por la altitud y la madurez, pueden influir sobre procesos celulares clave, incluyendo la expresión de genes relacionados con la protección frente al estrés oxidativo. Desde una perspectiva aplicada, el interés de esta investigación también incluye la valorización del mortiño y la mora andina como materias primas para el desarrollo de alimentos funcionales y nutracéuticos. En el contexto actual, existe una demanda creciente de productos naturales con beneficios documentados para la salud, particularmente aquellos que pueden contribuir a la prevención de enfermedades crónicas asociadas al envejecimiento y al estrés oxidativo, como las cardiovasculares y neurodegenerativas y ciertos tipos de cáncer. La identificación de las características bioactivas de estos frutos, junto con su impacto en un modelo vivo, como es Caernohabditis elegans, contribuirá a fortalecer su posicionamiento en el mercado global como ingredientes diferenciados y de alto valor añadido. Teniendo en cuenta los aspectos anteriores, el objetivo general de esta tesis doctoral es avanzar en el conocimiento de los mecanismos moleculares responsables de los efectos biológicos de los compuestos fenólicos presentes en frutos andinos, explorando su impacto en la resistencia al estrés oxidativo y la longevidad en Caenorhabditis elegans. Además, se busca determinar cómo factores ambientales, como la altitud de cultivo, y fisiológicos, como el grado de madurez de los frutos, influyen en la composición química y la actividad biológica de estos compuestos, vinculando estas variables con su potencial funcional en sistemas biológicos. Para alcanzar este objetivo general se han planteado los siguientes objetivos específicos: Interés y Objetivosm, Analizar el perfil de compuestos fenólicos, incluyendo antocianos, flavonoides y otros metabolitos bioactivos, en extractos de mortiño y mora andina, utilizando HPLC-DAD-ESI/MS. Examinar cómo la altitud de cultivo y el grado de madurez de los frutos influyen en la acumulación de compuestos fenólicos y su actividad biológica en sistemas modelo. Determinar la capacidad antioxidante in vitro de los extractos mediante ensayos específicos para cuantificar su actividad reductora y/o neutralizante de radicales libres. Evaluar los efectos de los extractos fenólicos sobre la resistencia al estrés oxidativo utilizando C. elegans como organismo modelo. Analizar su influencia en la longevidad de C. elegans, identificando posibles mejoras asociadas a la ingesta de los compuestos bioactivos. Investigar la regulación de genes clave relacionados con la ruta de la insulina/IGF-1 y el estrés oxidativo, utilizando técnicas de RT-PCR y cepas transgénicas de C. elegans. Generar evidencia científica que respalde el uso de frutos andinos como ingredientes funcionales en alimentos y nutracéuticos, promoviendo su valorización y uso sostenible. 2025-02-14T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/163745 [EN]Tubulin is a key protein in eukaryotic cells, participating in numerous processes as the fundamental units of microtubules, and its proper functioning is linked to the cell's fate. The search for new agents that can inhibit the activity of this protein in tumor cells or harmful organisms is essential. There are many drug-binding sites in the protein that alter its polymerization into microtubules, and some clinically used drugs target these sites, such as taxol© and colchicine, the latter lending its name to the binding site targeted by our compounds. In this thesis, we have designed, synthesized, isolated, characterized, and evaluated more than 230 tubulin inhibitors with potential antitumor and/or antiparasitic activity by binding to the colchicine site oftubulin. The compounds were designed based on known structures, such as CA4 (a well-known ligand of the colchicine site), or antiparasitic compounds discovered by the research group, and through the use of computational technologies aimed at identifying more potent compounds that interact better with the target protein. This approach combines both rational drug design and experimental validation to identify new tubulin inhibitors with enhanced therapeutic potential. The compounds have been classified into two major families. The first consists of CA-4 analogs, which are further divided into two groups depending on the bridge connecting both rings: sulfonamides and tetrazoles. The structure of CA-4 consists of two rings connected by an olefinic bridge. Modifications have been introduced in these three elements, allowing us to gain extensive knowledge of the structure-activity relationship of these derivatives. The compounds in this family were designed to have intrinsic fluorescence, aiding the study of the compounds themselves without the need for adding external fluorophores. The second family comprises amide compounds, focused on their use as antiparasitics, designed based on computer models and comparisons between parasite and mammalian sequences, with the aim of exploiting differences between them to achieve selectivity. The synthesized compounds were evaluated in vitro against a broad panel of tumor cell lines to assess their antitumor activity and against four parasites: Strongyloides spp., Trichinella spp., Schistosoma spp., and Leishmania spp. Studies on their mechanism of action have been conducted to understand how they interact with their biological target. These studies included cell cycle analysis, apoptosis assays, confocal microscopy, studies on cell migration, and inhibition of tubulin polymerization. The studies on tumor cells showed that the CA-4 analog compounds exhibited antiproliferative effects, in the best cases at a near-nanomolar range, causing apoptosis in the cells and disrupting the structure of their microtubules. Since the emergence of resistance is also one of the causes of therapeutic failure, it was studied and confirmed that these compounds are not substrates of MDR pumps, which are associated with resistance processes. Finally, it was demonstrated in vitro that these compounds were capable of inhibiting tubulin polymerization. On the other hand, molecules with interesting antiparasitic effects, especially against Strongyloides venezuelensis and Trichinella spiralis, have been reported, with some even tested in in vivo models of parasitosis. Since parasite tubulin is much less known, during this thesis work, experi ments were conducted to obtain the functional protein from the four studied parasites for further study and characterization. 2024-12-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/159756 [ES] En los últimos años, los ICIs han supuesto una de las estrategias más novedosas en el tratamiento frente al cáncer. Sin embargo, estos fármacos no están exentos de producir efectos tóxicos, entre ellos nefrotoxicidad. En este sentido, el diagnóstico del daño renal basado en los hallazgos clínicos y las pruebas de laboratorio (eosinofilia, piuria estéril…) presenta limitaciones para predecir la lesión e identificar el tipo de daño; la biopsia se postula como la única alternativa para diagnosticar la lesión y guiar la terapia pero es una técnica invasiva y que no está exenta de producir complicaciones. Por ello, se hace necesario investigar nuevos sistemas de diagnóstico, basados en biomarcadores urinarios, para intentar dar respuesta a una necesidad no resuelta. Nuestra hipótesis es que el daño renal asociado a los ICIs pudiera ser subclínico y no ser evidenciado por las pruebas habituales utilizadas en la práctica clínica. El diagnóstico mediante determinados biomarcadores urinarios podría suponer una herramienta óptima para detectar el daño en etapas más tempranas y de manera específica, lo que permitiría manejar al paciente de forma preventiva y personalizada. Para desarrollar esta hipótesis se plantean los siguientes objetivos: Objetivo I: Asociar la excreción de biomarcadores urinarios al daño renal subclínico en un modelo experimental de tratamiento con ICIs y de terapia combinada con quimioterapia. Paralelamente, realizar un estudio fisiopatológico para interpretar la relación existente entre los biomarcadores y el tipo de daño. Objetivo II: Validar un panel de biomarcadores urinarios como herramientas diagnósticas de daño renal en pacientes tratados con ICIs. 2024-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/159743 [ES] La tubulina, la proteína fundamental que forma los microtúbulos, es una de las dianas más estudiadas en la búsqueda de nuevos tratamientos contra al cáncer. Los compuestos antimitóticos, como el paclitaxel o los alcaloides de la vinca, son utilizados en la terapéutica actual. No obstante, estos tratamientos a menudo muestran resistencias, lo que conduce al fracaso terapéutico. Como alternativa, los ligandos de tubulina que se unen al dominio de la colchicina, presentan estructuras más sencillas que facilitan su síntesis. Además, en muchos casos no son sustratos de las bombas de eflujo que causan las resistencias. La combretastatina A-4 (CA4), ligando de referencia formado por dos anillos aromáticos A y B unidos por un puente olefínico, presenta inconvenientes en cuanto a sus propiedades fisicoquímicas y su inestabilidad configuracional. El reemplazo del puente olefínico de la CA4 por un grupo sulfonamida mantiene la configuración Z necesaria para la interacción con la diana a la vez que se aumenta la polaridad de la molécula. Hasta el momento, la inmensa mayoría de las sulfonamidas antimitóticas que mantienen como anillo A un 3,4,5-trimetoxifenilo presentan sobre éste el nitrógeno de la sulfonamida. En este trabajo de Tesis Doctoral se han sintetizado 77 nuevas sulfonamidas basadas en la CA4 con la dirección reversa del grupo sulfonamida con el fin de explorar la diferente disposición que pueden adoptar estos ligandos en el sitio de la colchicina. Además, se busca explorar los efectos que pueden tener los sustituyentes en el nitrógeno de la sulfonamida introduciendo una amplia variedad de grupos de diferente polaridad y volumen. Los compuestos sintetizados se clasifican en tres familias en función del anillo aromático B que presentan: fenilo (familia 1), naftilo (familia 2) e indolilo (familia 3). Todas las nuevas sulfonamidas reversas fueron evaluadas in vitro frente a diferentes líneas tumorales humanas. 25 de las nuevas sulfonamidas presentaron actividad antitumoral con valores de IC50 inferiores a 1 micromolar frente a la línea celular tumoral HeLa. La familia 3, con un anillo indólico como anillo B, es la familia más prometedora con 17 de estos 25 compuestos activos. Los ligandos de las familias 2 y 3 fueron evaluados adicionalmente frente a nueve líneas celulares tumorales y 3 líneas no tumorigénicas usando una metodología semiautomática durante la estancia predoctoral realizada en el Radiumhospitalet de Oslo. Las líneas MDA-MB468 paclitaxel resistente (PR) y BT474 mostraron cierta resistencia a los tratamientos antimitóticos usados como referencia (paclitaxel, docetaxel, vincristina and vinblastina). Sin embargo, las sulfonamidas indólicas 65, 97, 100, y 102, las cuales portan un grupo cianometilo sobre el nitrógeno de la sulfonamida, no pierden actividad frente a la línea MDA-MB468-PR. Por otro lado, la introducción de un grupo metilo sobre esta posición, sumado a la funcionalización de la posición 3’ del indol (96, 101, y 104) parece conferir cierta protección frente a la resistencia de BT474. La afinidad por las proteínas MDR fue evaluada, demostrando que la mayoría de los compuestos sintetizados no son sustrato de estas bombas. Además, se realizaron estudios del mecanismo de acción sobre una selección de los compuestos más potentes de cada familia. Los compuestos antimitóticos alteran la dinámica microtubular, evitando el correcto funcionamiento de la mitosis y generando una acumulación de células en esta fase del ciclo. Este efecto fue evaluado por citometría de flujo, al mismo tiempo que se estudiaba la muerte celular mediada por apoptosis. Esta apoptosis también se evaluó midiendo la activación de las caspasas 3 y 7. Por último, la integridad de la red microtubular fue analizada por medio de inmunofluorescencia frente a diferentes líneas celulares. Todos los compuestos evaluados indujeron acumulación de células en la fase G2/M del ciclo celular, seguido de muerte celular mediada por apoptosis. Estos efectos, sumados a la alteración de la red de microtúbulos tras el tratamiento, sugiere que las nuevas sulfonamidas siguen un mecanismo de acción antimitótico. Las propiedades farmacocinéticas de los compuestos activos también fueron estudiadas. La solubilidad acuosa de los compuestos de la familia 1 se midió empíricamente. Todos los compuestos estudiados mejoraron la solubilidad acuosa de la CA4, y muchos de ellos la de ABT-751. Por último, resultados in silico de estudios farmacocinéticos y de mutagenicidad demostraron las características favorables de los nuevos ligandos para ser futuros candidatos a nuevos estudios preclínicos. [EN] Tubulin is a crucial component of the mitotic spindle and is commonly targeted in cancer therapy. Antimitotic drugs such as paclitaxel and vinca alkaloids are currently employed against various tumours. However, these treatments often involve resistance, leading to therapeutic failure. As an alternative, many tubulin ligands that bind to the colchicine domain are not substrates for the efflux pumps that cause resistance. Additionally, these ligands have simpler structures that make their synthesis easier. Combretastatin A-4 (CA4), a reference ligand of this domain composed of two aromatic rings (A and B) connected by an olefinic bridge, has drawbacks due to its physicochemical properties and configurational instability. Replacing the olefinic bridge in CA4 by a sulfonamide group preserves the Z configuration necessary for interacting with the binding site and increases the molecule's polarity. Nowadays, most antimitotic sulfonamides with a 3,4,5-trimethoxyphenyl group as A ring have the sulfonamide nitrogen attached to this ring. In this doctoral thesis, 77 new sulfonamides based on CA4 have been synthesized with the sulfonamide group oriented in reverse. This project aims to evaluate the impact of this new orientation at the colchicine binding site and investigate the effects of various substituents on sulfonamide nitrogen. Three families of new reversed sulfonamides emerged from this work, classified by the aromatic B ring: phenyl (family 1), naphthyl (family 2), and indolyl (family 3). All of them were evaluated in vitro against different human tumour cell lines. 25 of the new sulfonamides exhibited antitumor activity with an IC50 lower than 1 micromolar against HeLa cancer cell line. Family 3, with an indole as B ring, is the most promising family with 17 out of these 25 active compounds. The active compounds of families 2 and 3 were evaluated against nine cancer cell lines and three non-tumoral cell lines using a semiautomatic methodology during a short stay in the Radiumhospitalet of Oslo. MDA-MB468-paclitaxel resistant (PR) and BT474 exhibit resistance against the antimitotic drugs used as reference (paclitaxel, docetaxel, vincristine and vinblastine). However, the indole sulfonamides 65, 97, 100, and 102, which feature a cyanomethyl group on the sulfonamide bridge, do not lose activity against MDA-MB468-PR. On the other hand, the introduction of a methyl group on the sulfonamide nitrogen in this family, combined with the functionalization of the 3' position of the indole (96, 101, and 104), results in compounds that are not affected by resistance against BT474. Their affinity for MDR proteins was evaluated, and most of them were not substrates of those proteins. Additionally, the mechanism of action of selected compounds from each family was assessed. Antimitotic drugs interfere with tubulin dynamics, preventing chromosome segregation and arresting cells in mitosis. This effect was evaluated by flow cytometry, as well as the evaluation of apoptotic cell death. Apoptosis was also studied by measuring the activation of caspases 3 and 7. Finally, the integrity of the microtubular network was examined using immunofluorescence against different cell lines. All the tested compounds induced cell cycle arrest at G2/M stage, leading to apoptosis-mediated cell death. These effects, along with the disruption of the microtubular network caused by the treatment, suggest that the new sulfonamides operate via an antimitotic mechanism of action. The pharmacokinetic properties of the active compounds were also studied. The aqueous solubility of the compounds from family 1 was empirically measured. All the compounds studied improved the aqueous solubility of CA4, and many of them also enhanced the solubility of ABT-751. Finally, in silico results from pharmacokinetic and mutagenicity studies demonstrated the favourable characteristics of the new ligands to be potential candidates for future preclinical studies. 2024-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/158837 [EN] The sustainable and proper use of planetary resources is a major global concern nowadays; therefore, studying vegetable species and implementing sustainable strategies for proper crop management is extremely necessary. Identifying relevant plans of action at local, national, and international levels, with simultaneous economic, environmental, and social impacts, is essential for achieving sustainable goals and meeting the needs of current and future generations. Physiological and morphological characteristics of vegetable species are strongly influenced by biotic and abiotic factors. Responses to these factors are complex and vary among different vegetable species, impacting primary and secondary metabolism and influencing various phenotypical parameters. These effects extend to the biosynthesis and accumulation of different compounds, such as soluble sugars, carbohydrates, fatty acids, phenolic compounds, terpenes, alkaloids, among others. Complete knowledge and characterization of vegetable species are necessary to increase crop profitability, enhance the added value of crops, and reduce discarded vegetable material. Cynara cardunculus L. (syn. cardoon) is widely distributed in the surrounding countries of the Mediterranean basin, it is used in folk medicine and several traditional recipes. It is appreciated for its rich phytochemical and nutritional composition. The primary objective of this work was to understand how the chemical composition and bioactive properties of C. cardunculus plant parts vary throughout a complete growth cycle, thus allowing us to improve the knowledge of this species and all its constituents, to maximize its full potential. The different cardoon tissues, collected in Greece, were harvested through their development cycle, and extensively characterized for their chemical composition (Chapter 3) and bioactive properties (Chapter 4). Cardoon blades, bracts, heads, seeds, and petioles with principal growth stages between 1 and 9, were studied. The lipidic fraction and the composition of fatty acids, free sugars, tocopherols, and organic acids were analyzed using appropriate chromatographic methodologies for each class of compounds. The hydroethanolic extract of each sample was obtained and characterized for its phenolic composition and bioactive properties. The anti-inflammatory, antiproliferative, antioxidant, and antimicrobial capacities were also studied. All parameters studied were influenced by the date of sample collection, affecting the potential alternative uses in the most varied industrial sectors. Cardoon exhibited a wide variety of phenolic compounds, namely phenolic acids and flavonoids. Samples of heads, blades, bracts, and petioles collected at the time of inflorescence (principal growth stage (PGS) between 5 and 6/7), showed more promising bioactive properties, as well as higher levels of phenolic compounds. Contrary to seeds, where the content of phenolic compounds increased with the growth cycle, samples with PGS 7/8 revealed a greater bioactive potential. The obtained results were analyzed through several statistical methods to understand how the chemical composition and bioactivities of C. cardunculus plant parts vary throughout a complete growth cycle (Chapter 5). The influence of the different seasons on the species was evident, resulting in a clear discrimination between the samples harvested throughout the growth cycle. Additionally, observed fluctuations in chemical composition were consistent with the functions of each vegetable tissue and the different physiological processes in the plant. Despite the wide variety of industrial applications of cardoon, about 60 to 85% of the plant tissues of this species are not properly used, contributing to thousands of tons of waste generated worldwide. Producing countries such as Portugal, Spain, and Italy estimate that approximately 10 to 30 t/ha (62% corresponding to stems and blades and 38% to heads) of dry biomass are generated depending on irrigation and fertilization conditions. The outer stalks and blades of the cardoon plant can be hard and fibrous in texture, so they are often removed and discarded before using the tender inner parts. Thus, the samples with the most promising activities were characterized regarding fiber content to determine which plant tissue would be the most interesting for use as a functional ingredient (Chapter 5). In this respect, due to their high fiber content, cardoon blades exhibit the highest potential for being reused as a source of dietary fiber, while simultaneously being rich in compounds of great functional activity. Therefore, cardoon blades extract was used to enrich the nutritional and functional properties of a vegetable and fruit-based smoothie, within a zero-waste approach that involved reusing the extracted blades residue as a source of dietary fiber. The obtained functional smoothie was pasteurized by high-pressure processing (550 MPa for 3 minutes, HPP), an emerging non-thermal technology, and through conventional thermal pasteurization (90 ºC for 30 seconds, TP) (Chapter 6). According to the obtained results, cardoon blades were demonstrated to be a promising functional ingredient since it improved the chemical composition of smoothies, as well as their stability over storage. HPP technology showed the ability to preserve the nutritional and chemical composition of the smoothies, thus favoring their bioactive properties. This emerging technology offers an innovative alternative that guarantees quality without compromising nutritional benefits. Despite the enrichment with dietary fiber caused an increase in viscosity, the addition of the extraction residue increased the fiber content which, together with the benefits contributed by the blades extract, allowed for an improvement in the functional properties and fiber stability in the smoothies over shelf life. All the prepared formulations met the microbiological criteria, but the enrichment with cardoon blades resulted in more effective microbiological decontamination, leading to a lower presence of the detected microorganisms. The work developed could have a transformative impact on the food industry and other industrial sectors interested in the products/processes developed. Implementing nonthermal methodologies that ensure the safety of food products, as well as their quality, biochemical composition, and consequent benefits of their consumption, could be an important technological and functional advance. The reuse of nutrients, including fibers, and the recovery of phytochemicals from agricultural by-products would greatly contribute to favor of the bioeconomy and the valorization of alternative crops, as well as their producing countries. This validation could also contribute to expanding the industrial and/or commercial applicability of the technologies used. [ES] La utilización sostenible y adecuada de los recursos del planeta es una de las mayores preocupaciones globales de hoy en día, por lo que el estudio de las especies vegetales y la aplicación de estrategias sostenibles para una gestión adecuada de los cultivos son sumamente necesarios. La identificación de planes de acción que puedan adoptarse a escala local, nacional e internacional, con repercusiones económicas, medioambientales y sociales simultáneas, es esencial para alcanzar objetivos sostenibles y garantizar las necesidades de las generaciones actuales y futuras. Las características fisiológicas y morfológicas de las especies vegetales están muy influidas por factores bióticos y abióticos. Las respuestas de las especies a estos factores son complejas y presentan características distintas, dependiendo de cada especie vegetal. Estos fenómenos tienen un enorme impacto en el metabolismo primario y secundario, influyendo de manera determinante en casi todos los aspectos fenotípicos. También interfieren en la biosíntesis y acumulación de diferentes clases de compuestos (por ejemplo, azúcares solubles, carbohidratos, ácidos grasos, compuestos fenólicos, terpenos o alcaloides, entre otros). La caracterización y el conocimiento más completo posible de las especies vegetales son necesarios para ayudar a conseguir una mayor rentabilidad, aumentando el valor de los cultivos y reduciendo el material vegetal desechado. Cynara cardunculus L. (nombre común: cardo o cardo comestible) es una planta ampliamente distribuida en los países de la cuenca mediterránea, donde es utilizada en medicina popular y en diversas recetas tradicionales, apreciada por su rica composición fitoquímica y nutricional. El objetivo principal de este trabajo es comprender cómo varían la composición química y las propiedades bioactivas de las distintas partes de la planta a lo largo de un ciclo completo de crecimiento, lo que nos permitirá mejorar nuestro conocimiento de la especie y de todos sus constituyentes para aprovechar al máximo todo su potencial. Los distintos tejidos del cardo, recolectados en Grecia, se cosecharon a lo largo de todo su ciclo de desarrollo y se caracterizaron exhaustivamente en cuanto a su composición química (Capítulo 3) y sus propiedades bioactivas (Capítulo 4). Se estudiaron las hojas, brácteas, capítulos florales, semillas y peciolos del cardo, a lo largo de sus principales etapas de crecimiento (Principal Growth Stages, PGS, fases 1 a 9). La fracción lipídica y la composición en ácidos grasos, azúcares libres, tocoferoles y ácidos orgánicos se analizaron utilizando las metodologías cromatográficas apropiadas para cada clase de compuestos. Se obtuvo también el extracto hidroetanólico de cada una de las muestras y se caracterizó en términos de composición fenólica y propiedades bioactivas. En particular, se estudiaron las capacidades antiinflamatorias, antiproliferativas, antioxidantes y antimicrobianas siguiendo los protocolos respectivos. Todos los parámetros estudiados se vieron influidos por la fecha de recogida de la muestra, influyendo así sobre el potencial de aplicaciones en distintos sectores industriales. El cardo presentaba una amplia variedad de compuestos fenólicos, concretamente ácidos fenólicos y flavonoides. Las muestras de los capítulos florales, hojas, brácteas y peciolos recogidas en el momento de la inflorescencia (PGS entre 5 y 6/7) presentaron las propiedades bioactivas más prometedoras, así como niveles más elevados de compuestos fenólicos. Sin embargo, en las semillas el contenido de compuestos fenólicos aumentaba con el ciclo de crecimiento, siendo las muestras con PGS 7/8 las que mostraron mayor potencial bioactivo. Los resultados obtenidos se analizaron mediante diversos métodos estadísticos para comprender cómo varían la composición química y las bioactividades de las distintas partes de la planta a lo largo del ciclo completo de crecimiento (Capítulo 5). La influencia de las distintas estaciones sobre la especie fue evidente, lo que se traducía en una clara discriminación entre las muestras tomadas en las diferentes etapas. Por otra parte, las fluctuaciones observadas en la composición química eran coherentes con las funciones de cada tejido vegetal y los procesos fisiológicos de la planta. A pesar de la gran variedad de aplicaciones industriales del cardo, entre el 60 y el 85 % de los tejidos vegetales de esta especie no se utilizan adecuadamente, lo que contribuye a la generación de miles de toneladas de residuos en todo el mundo. En países productores, como Portugal, España e Italia, se estima que se producen alrededor de 10 a 30 t/ha (62 % correspondientes a tallos y hojas, y 38 % a cabezas florales) de biomasa seca, dependiendo de las condiciones de riego y fertilización. Los tallos y las hojas exteriores de la planta de cardo suelen tener una textura dura y fibrosa, por lo que generalmente se retiran y desechan para utilizar las partes tiernas interiores. Por ello, las muestras con la actividad más prometedora se caracterizaron en términos de contenido en fibra para determinar qué tejido vegetal sería el más interesante para su uso como ingrediente (Capítulo 5). Así, se pudo establecer que las hojas de cardo tienen un gran potencial para ser reutilizadas como fuente de fibra dietética, al tiempo que son ricas en compuestos de gran interés farmacológico. De este modo, se utilizó el extracto de las hojas de cardo para enriquecer las propiedades nutricionales y funcionales de un batido (smoothie) a base de verduras y frutas, bajo un enfoque de residuo cero, que implicaba también la adición del residuo obtenido tras la extracción de las hojas como fuente de fibra dietética. El batido funcional preparado se pasteurizó mediante procesado por alta presión (550 MPa durante 3 minutos, HPP), una tecnología emergente no térmica, y también mediante pasteurización térmica convencional (90 ºC durante 30 segundos, TP) (Capítulo 6). Los resultados obtenidos pusieron de manifiesto que las hojas de cardo constituían un ingrediente funcional prometedor, mejorando la composición fitoquímica de los batidos, así como su estabilidad durante el almacenamiento. La tecnología emergente HPP demostró ser particularmente útil para preservar la composición nutricional y química de los batidos y favorecer sus propiedades bioactivas, representando una alternativa innovadora para garantizar la calidad sin comprometer los beneficios nutricionales. Aunque el enriquecimiento con el residuo fibroso provocaba un aumento en la viscosidad, su incorporación, junto con la del extracto de las hojas, permitía mejorar las propiedades funcionales y el contenido y estabilidad de la fibra en los batidos durante su vida útil. Todas las formulaciones ensayadas cumplían con los criterios microbiológicos, pero el enriquecimiento con las hojas de cardo daba lugar a una descontaminación microbiana más eficaz, con cuentas más bajas de microorganismos. El trabajo realizado podría tener un impacto transformador en la industria alimentaria y otros sectores industriales interesados en los productos/procesos desarrollados. La implementación de metodologías no térmicas que garanticen la seguridad de los productos alimentarios, así como su calidad y composición nutricional y fitoquímica, con los consiguientes beneficios de su consumo, supone un importante avance tecnológico. La reutilización de nutrientes, incluyendo la fibra alimentaria, y la recuperación de fitoquímicos a partir de subproductos agrícolas contribuiría en gran medida a favorecer la bioeconomía y a la valorización de cultivos alternativos, con el beneficio consiguiente para sus países productores. Esta validación de las tecnologías utilizadas debe también contribuir a diversificar su aplicabilidad industrial y a una mejora en el valor comercial de los productos obtenidos. [POR] A utilização sustentável e adequada dos recursos do planeta é uma das maiores preocupações globais da atualidade, pelo que o estudo das espécies vegetais e a implementação de estratégias sustentáveis para uma gestão adequada das culturas é extremamente necessário. A identificação de planos de ação relevantes que possam ser adotados a nível local, nacional e internacional, com simultâneo impacto económico, ambiental e social, é essencial para atingir objetivos sustentáveis e assegurar as necessidades das gerações atuais e futuras. As características fisiológicas e morfológicas das espécies vegetais são fortemente influenciadas por fatores bióticos e abióticos. As respostas das espécies a esses fatores são complexas e com características distintas, dependendo de cada espécie vegetal. Estes fenómenos têm um enorme impacto no metabolismo primário e secundário, influenciando fortemente quase todos os parâmetros fenotípicos. Interferem também na biossíntese e acumulação de diferentes classes de compostos (açúcares soluvéis, hidratos de carbono, ácidos gordos, compostos fenólicos, terpenos, alcaloides, entre outros). O conhecimento e a caraterização completa das espécies vegetais são necessários para ajudar a alcançar uma maior rentabilidade, aumentando o valor das culturas e reduzindo o material vegetal descartado. Cynara cardunculus L. (cardo) está amplamente distribuído nos países da bacia mediterrânica, é utilizado na medicina popular e em várias receitas tradicionais, apreciado pela sua rica composição fitoquímica e nutricional. O principal objetivo deste trabalho foi compreender de que forma a composição química e as propriedades bioativas das diferentes partes da planta variam ao longo de um ciclo completo de crescimento, permitindo assim melhorar o conhecimento da espécie e de todos os seus constituintes, para maximizar todo o seu potencial. Os diferentes tecidos do cardo, recolhidos na Grécia, foram colhidos ao longo do seu ciclo de desenvolvimento e foram extensivamente caracterizados quanto à sua composição química (Capítulo 3) e propriedades bioativas (Capítulo 4). Foram estudadas as lâminas, brácteas, capítulos florais, sementes e pecíolos do cardo, com os principais estados de crescimento (Principal Growth Stages, PGS) entre 1 e 9. A fração lipídica e a composição em ácidos gordos, açúcares livres, tocoferóis e ácidos orgânicos foram analisadas utilizando as metodologias cromatográficas adequadas a cada classe de compostos. O extrato hidroetanólico de cada uma das amostras foi obtido e caracterizado quanto à sua composição fenólica e propriedades bioativas. As capacidades anti-inflamatória, antiproliferativa, antioxidante e antimicrobiana foram estudadas seguindo os respetivos protocolos. Todos os parâmetros estudados foram influenciados pela data de recolha da amostra, afetando assim o potencial de aplicações nos mais variados sectores industriais. O cardo exibiu uma grande variedade de compostos fenólicos, nomeadamente ácidos fenólicos e flavonoides. As amostras dos capítulos florais, lâminas, brácteas e pecíolos recolhidos na altura da inflorescência (PGS entre 5 e 6/7), apresentaram propriedades bioativas mais promissoras, bem como teores mais elevados de compostos fenólicos. Porém, nas sementes o teor de compostos fenólicos aumentou com o ciclo de crescimento, sendo as amostras com PGS 7/8 as que apresentaram maior potencial bioativo. Os resultados obtidos foram analisados através de vários métodos estatísticos para compreender como a composição química e as bioatividades das partes da planta C. cardunculus variam ao longo do ciclo de crescimento completo (Capítulo 5). A influência das diferentes estações do ano na espécie foi evidente, resultando numa clara discriminação entre as amostras colhidas. Além disso, as flutuações observadas na composição química foram coerentes com as funções de cada tecido vegetal e com os diferentes processos fisiológicos da planta. Apesar da grande variedade de aplicações industriais do cardo, cerca de 60 a 85% dos tecidos vegetais desta espécie não são devidamente aproveitados, contribuindo para os milhares de toneladas de resíduos gerados a nível mundial. Em países produtores como Portugal, Espanha e Itália estima-se que são geradas cerca de 10 a 30 t/ha (62% correspondentes a caules e folhas e 38% a cabeças) de biomassa seca, dependendo das condições de rega e fertilização. Os caules e as lâminas exteriores da planta do cardo podem ser duros e de textura fibrosa, pelo que são frequentemente removidos e deitados fora antes de se utilizarem as partes interiores tenras. Por isso, as amostras com atividade mais promissora foram caracterizadas quanto ao teor de fibras, para determinar qual tecido vegetal seria o mais interessante para uso como ingrediente funcional (Capítulo 5). Constatou-se que as folhas do cardo apresentam grande potencial para serem reutilizadas como fonte de fibras alimentares, sendo simultaneamente ricas em compostos de grande interesse farmacológico. Assim, o extrato das lâminas de cardo foi utilizado para enriquecer as propriedades nutricionais e funcionais de um smoothie à base de vegetais e frutas, sob uma abordagem de desperdício zero que envolveu a reutilização do resíduo das lâminas extraídas como fonte de fibra alimentar. O smoothie funcional obtido foi pasteurizado por processamento a alta pressão (550 MPa durante 3 minutos, HPP), uma tecnologia emergente não térmica, e também por pasteurização térmica convencional (90 ºC durante 30 segundos, TP) (Capítulo 6). De acordo com os resultados obtidos, as lâminas de cardo demonstraram ser um ingrediente funcional promissor, uma vez que melhoraram a composição fitoquímica dos smoothies, bem como a sua estabilidade durante o armazenamento. A tecnologia HPP demonstrou a capacidade de preservar a composição nutricional e química dos smoothies, favorecendo assim as suas propriedades bioativas. Esta tecnologia emergente oferece uma alternativa inovadora que garante a qualidade sem comprometer os benefícios nutricionais. Embora o enriquecimento com o resíduo fibroso provoque um aumento da viscosidade, a sua incorporação, juntamente com a do extrato das lâminas, permitiu melhorar as propriedades funcionais e o conteúdo e estabilidade da fibra nos smoothies ao longo do tempo de prateleira. Todas as preparações testadas cumpriram os critérios microbiológicos, mas a fortificação com lâminas de cardo resultou em uma descontaminação microbiana mais eficaz, com menor presença dos microrganismos detetados. O trabalho desenvolvido pode ter um impacto transformador na indústria alimentar e em outros sectores industriais interessados nos produtos/processos desenvolvidos. A implementação de metodologias não térmicas que garantem a biossegurança dos produtos alimentares, bem como a sua qualidade e composição nutricional e fitoquímica, com os consequentes benefícios do seu consumo, é um importante avanço tecnológico. O reaproveitamento de nutrientes, incluindo as fibras alimentares, e a recuperação de compostos bioativos de subprodutos agrícolas contribuiriam para a promoção da bioeconomia e a valorização de culturas alternativas, com o consequente benefício para os seus países produtores. Essa validação das tecnologias utilizadas deverá igualmente contribuir para ampliar a aplicabilidade industrial e melhorar o valor comercial dos produtos obtidos. 2024-02-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/158294 [ES] La ingesta moderada y regular de alimentos ricos en polifenoles proporciona beneficios cognitivos. Concretamente, la suplementación de flavanoles y estilbenos mejora la atención, la velocidad psicomotora, el recuerdo retardado y el reconocimiento de palabras. La acción conjunta de flavonoides mejora la memoria visual en pacientes sin deterioro cognitivo y la memoria de trabajo en pacientes con patología cognitiva. Las uvas pasas, una de las frutas secas que caracteriza a la dieta mediterránea, son una de las principales fuentes de polifenoles. El suplemento diario de 50 g de uvas pasas Moscatel Málaga durante 6 meses, en población mayor de 70 años, mejora la orientación, la capacidad visoespacial, el lenguaje, la puntuación global del MoCA, el recuerdo inmediato y el recuerdo retardado. Además, se observa una ligera mejoría en la calidad de vida y en las actividades funcionales y una disminución de la IL-1. No hay cambios significativos en la glucosa, el colesterol total, el colesterol HDL, el colesterol LDL ni los triglicéridos. Hasta donde sabemos, este es un estudio pionero que analiza el efecto de las uvas pasas, alimento rico en polifenoles, en una población que, debido a su edad avanzada, presenta mayor riesgo de desarrollar deterioro cognitivo. [EN] Moderate and regular intake of polyphenol-rich foods provides cognitive benefits. Specifically, supplementation of flavanols and stilbenes improves attention, psychomotor speed, delayed recall and word recognition. The combined action of flavonoids improves visual memory in patients without cognitive impairment and working memory in patients with cognitive pathology. Raisins, one of the dried fruits that characterize the Mediterranean diet, are one of the main sources of polyphenols. The daily supplementation of 50 g of Malaga Muscatel raisins during 6 months, in a population over 70 years old, improves orientation, visuospatial capacity, language, MoCA global score, immediate and delayed memory. In addition, a slight improvement in quality of life and functional activities and a decrease in IL-1 is observed. There are no significant changes in glucose, total cholesterol, HDL cholesterol, LDL cholesterol and triglycerides. To our knowledge this is a pioneering study that analyzes the effect of raisins, a food rich in polyphenols, in a population that, due to their advanced age, presents a higher risk of developing cognitive impairment. 2023-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/158284 [ES] El objetivo general es mejorar la seguridad del paciente mediante identificación y prevención de los problemas relacionados con los medicamentos en un servicio de urgencia hospitalario. 2023-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/158113 [EN] The skin undergoes visible changes over time, reflecting the combined effects of intrinsic and extrinsic insults. Intrinsic ageing primarily results from natural physiological changes. Conversely, external factors, such as pollution, lifestyle habits, and exposure to ultraviolet radiation (UVR), play a significant role in extrinsic ageing. From all the insults, UVR is considered the primary contributor to skin ageing, accounting for 80% of its visible signs. Despite the highly effective barrier the skin layers provide, UVR can induce oxidative stress in human skin. When the load of reactive species in this organ is high, several pathways are activated, culminating in the degradation of extracellular matrix proteins such as collagen and elastin by the upregulation of metalloproteinases (MMPs) and other enzymes. Neutrophil elastase is considered one of the most destructive enzymes in this process due to its ability to degrade almost all extracellular matrix components by directly activating MMPs (pro- and active forms), facilitating their progression, and inactivating their activity regulators. The interplay of intrinsic and extrinsic factors shapes phenotypically distinct clinical manifestations. Chronological ageing leads to skin changes such as thinning, pallor, fine surface wrinkles, and reduced elasticity. In contrast, prolonged exposure to UVR results in more severe manifestations, including pronounced wrinkles, loss of elasticity, thickening, coarsening, dryness, telangiectasias, and uneven pigmentation. Hydrolysable tannins are recognised for their skin anti-ageing properties, particularly their strong antioxidant effects and their ability to inhibit elastolytic enzyme precursors. The genus Cytinus, described as one of the most enigmatic in the plant kingdom, has garnered attention for its potential as a source of bioactive compounds. While its properties were ascribed to its hydrolysable tannin content, the chemical composition of Cytinus hypocistis (L.) L. had not undergone thorough characterisation, and its active constituents remained undisclosed prior to the research conducted in the present thesis. Therefore, the primary objective of this work was to valorise the underexplored parasitic species Cytinus hypocistis (L.) L. subsp. macranthus Wettst by conducting its comprehensive characterisation, followed by a more detailed investigation of its skin anti-ageing properties. The chemical and bioactive characterisation (Chapter 3) was performed by analysing the nutritional and phytochemical profile of C. hypocistis and evaluating its bioactive properties. To the author's best knowledge, there are no studies on this edible plant's nutritional characterisation. The whole plant and its nectar revealed being nutritionally balanced, shedding light on its significance as famine food in the past. Its nectar proved to be a good source of protein and unsaturated fatty acids, approximately 2- fold higher than the whole plant. The phytochemical profile and bioactive properties of the whole plant, its petals, stalks, and nectar were also evaluated. Seventeen phenolic compounds were identified in all samples. Galloyl-bis-HHDP-glucose was the most abundant, with no significant difference in concentration between the petals and the whole plant. All extracts exhibited antidiabetic, antityrosinase, antibacterial, and cytotoxicity against four tested tumour cell lines, with no toxicity observed on a non-tumour cell line. The antioxidant capacity was the most prominent among the assessed activities, with no significant differences between the petals and the whole plant. The results from Chapter 3 suggested a relationship between phenolic compound concentration and C. hypocistis bioactive properties, rendering it necessary to investigate whether there is a phenolic compound exchange between the host and the parasite (Chapter 4). To the authors' best knowledge, this work was the first to compare the phenolic profile and bioactive properties of the parasite C. hypocistis and its host, Halimium lasianthum subsp. alyssoides (Lam.) Greuter. Except for one compound, trigalloyl-HHDP-glucoside, the phenolic profile of the host (both non-parasited and parasited) was different from that of the parasite, which possibly indicates the existence of a proper pathway of compound biosynthesis in the parasite. This hypothesis was supported by the PCA analysis, where three defined groups were identified: root extracts from H. lasianthum, aerial extracts from H. lasianthum, and C. hypocistis extracts. This work also highlighted the correlation between C. hypocistis hydrolysable tannin content and its antioxidant and anti-tyrosinase activities. C. hypocistis' biological properties were potentially correlated with its high content in hydrolysable tannins; thus, studying their extraction optimisation would give comprehensive clues for recovering these high-added-value bioactive compounds (Chapter 5). This work applied Response Surface Methodology to optimise tannin extraction using Heat-Assisted (HAE) and Ultrasound-Assisted (UAE) methods. Two three-factor Rotatable Central Composite Designs were used to assess the independent variables' linear, quadratic, and interactive effects on the target responses. The results from both extraction systems revealed high ethanol percentages as the critical factor in increasing tannin content, with UAE being selected as the best technique for the recovery. The skin anti-ageing properties of C. hypocistis optimal extracts from three distinct years were assessed, followed by a biochemometric approach to identify the discriminant metabolites associated with the most relevant properties (Chapter 6). Among the studied bioactivities, the anti-elastase results exhibited a significant variation among the samples from different years. A bioassay-guided fractionation was performed to identify the discriminant features responsible for this variation, followed by its purification and structural elucidation. Remarkably, one of the purified subfractions exhibited a tenfold improvement in neutrophil elastase inhibition efficacy compared to the crude extract; its effectiveness fell within the same range as SPCK, a potent irreversible elastase inhibitor. Overall, this subfraction also presented better antioxidant and enzyme inhibitory properties (collagenase and tyrosinase) than the crude extract and the positive controls, with no phototoxicity and cytotoxicity against different skin cell lines. Upon NMR structural clarification, this subfraction was elucidated as a galloyl glucose congener as indicated by characteristic spectral resonances of pedunculagin. However, the purified fraction seems to remain a mixture of isomers with differences in glucose, which might indicate that the anti-ageing compound found in C. hypocistis could be pedunculagin configurational isomers. The work developed in the present thesis comprehensively characterised the unexploited species C. hypocistis, offering insights into its use as famine food in the past and as a source of compounds with a broad spectrum of bioactive properties. Furthermore, it was possible to identify the compound class of utmost relevance for its bioactivities, validate its exclusive biosynthesis within the parasite, and maximise its recovery. Finally, C. hypocistis confirmed its potential as a source of anti-ageing compounds, revealing excellent antioxidant and enzyme-inhibitory properties, particularly its antineutrophil elastase activity. [ES] La piel experimenta cambios visibles con el tiempo, reflejando los efectos combinados de factores intrínsecos y extrínsecos. El envejecimiento intrínseco se debe principalmente a cambios fisiológicos naturales, mientras que la contaminación, hábitos de vida y la exposición a radiación ultravioleta (UVR) desempeñan un papel significativo en el envejecimiento extrínseco. De todas las agresiones que experimenta la piel, se considera que la UVR es la principal contribuyente a su envejecimiento, representando el 80% de sus signos visibles. A pesar de la barrera altamente efectiva que proporcionan las diferentes capas, la UVR puede inducir estrés oxidativo en la piel humana. Cuando la carga de especies reactivas en este órgano es alta, se activan varias vías que culminan en la degradación de proteínas de la matriz extracelular, como el colágeno y la elastina, mediante la sobreexpresión de metaloproteinasas (MMP) y otras enzimas. La elastasa de neutrófilos se considera una de las enzimas más destructivas en este proceso debido a su capacidad para degradar casi todos los componentes de la matriz extracelular mediante la activación directa de MMPs (formas proactivas y activas), facilitando su progresión e inactivando sus reguladores de actividad. La interacción de factores intrínsecos y extrínsecos da forma a manifestaciones clínicas fenotípicamente distintas. El envejecimiento cronológico conduce a cambios en la piel, como adelgazamiento, palidez, arrugas finas en la superficie y reducción de la elasticidad. En contraste, la exposición prolongada a la UVR resulta en manifestaciones más severas, que incluyen arrugas pronunciadas, pérdida de elasticidad, engrosamiento, rugosidad, sequedad, telangiectasias y pigmentación desigual. Los taninos hidrolizables son reconocidos por sus propiedades antienvejecimiento en la piel, especialmente por sus fuertes efectos antioxidantes y su capacidad para inhibir los precursores de enzimas elastolíticas. El género Cytinus (Cytinaceae), descrito como uno de los más enigmáticos en el reino vegetal, ha llamado la atención por su potencial como fuente de compuestos bioactivos. Aunque sus propiedades se atribuyeron a su contenido de taninos hidrolizables, la composición química de Cytinus hypocistis (L.) L. no había sido todavía caracterizada a fondo, y sus constituyentes activos permanecían sin revelar antes de la investigación realizada en la presente tesis. Por lo tanto, el objetivo principal de este trabajo ha sido el de valorizar la especie parasitaria poco explorada Cytinus hypocistis (L.) L. subsp. macranthus Wettst mediante una caracterización química integral, seguida de una investigación más detallada de sus propiedades antienvejecimiento en la piel. La caracterización química y bioactiva (Capítulo 3) fue realizada a través del análisis del perfil nutricional y fitoquímico de C. hypocistis, así como con la evaluación de sus propiedades bioactivas. Hasta donde el autor sabe, este es el primer trabajo que estudia la caracterización nutricional de esta planta comestible. Toda la planta y su néctar demostraron ser equilibrados desde el punto de vista nutricional, arrojando luz sobre su importancia como alimento en tiempos de hambruna en el pasado. Se demostró que su néctar es una buena fuente de proteínas y ácidos grasos insaturados, aproximadamente el doble que toda la planta. También se evaluó el perfil fitoquímico y las propiedades bioactivas de toda la planta, sus pétalos, tallos y néctar. Se identificaron diecisiete compuestos fenólicos en todas las muestras. El galato-bis-HHDP-glucosa fue el más abundante, sin mostrar una diferencia significativa de concentración entre los pétalos y toda la planta. Todos los extractos mostraron actividad antidiabética, anti-tirosinasa, antibacteriana y citotoxicidad frente a las cuatro líneas celulares tumorales ensayadas sin observar toxicidad en una línea celular no tumoral. La capacidad antioxidante fue la más destacada entre las actividades evaluadas, también sin diferencias significativas entre los pétalos y toda la planta. Los resultados del Capítulo 3 sugirieron una relación entre la concentración de compuestos fenólicos y las propiedades bioactivas de C. hypocistis, haciendo necesario investigar si hay un intercambio de compuestos fenólicos entre el huésped y la planta parásita (Capítulo 4). Según el conocimiento de los autores, este trabajo también fue el primero en comparar el perfil fenólico y las propiedades bioactivas del parásito C. hypocistis y su huésped, Halimium lasianthum subsp. alyssoides (Lam.) Greuter (Cistaceae). Excepto por un compuesto, el trigaloyl-HHDP-glucósido, el perfil fenólico del huésped (tanto no parasitado como parasitado) fue diferente al del parásito, lo que posiblemente indica la existencia de una vía adecuada de biosíntesis de compuestos en el parásito. Esta hipótesis fue respaldada por el análisis de PCA, donde se identificaron tres grupos definidos: extractos de raíces de H. lasianthum, extractos aéreos de H. lasianthum y extractos de C. hypocistis. Este trabajo también destacó la correlación entre el contenido de taninos hidrolizables de C. hypocistis y sus actividades antioxidantes y anti-tirosinasa. Las propiedades biológicas de C. hypocistis estuvieron potencialmente correlacionadas con su alto contenido de taninos hidrolizables; por lo tanto, estudiar la optimización de su extracción proporcionaría pistas completas para recuperar estos compuestos bioactivos de alto valor añadido (Capítulo 5). Este trabajo aplicó la Metodología de Superficie de Respuesta para optimizar la extracción de taninos utilizando los métodos de Asistencia Térmica (HAE) y Asistencia Ultrasónica (UAE). Se aplicó un diseño compuesto central y rotativo para la optimización, que constaba de tres factores para evaluar los efectos lineales, cuadráticos e interactivos de las variables independientes en las respuestas objetivo. Los resultados de ambos sistemas de extracción revelaron altos porcentajes de etanol como el factor crítico para aumentar el contenido de taninos, y se seleccionó UAE como la mejor técnica para la recuperación de los mismos. Se evaluaron las propiedades antienvejecimiento en la piel de los extractos óptimos de muestras de C. hypocistis recogidas en tres años distintos, seguidas de un enfoque bioquimiométrico para identificar los metabolitos discriminantes asociados con las propiedades más relevantes (Capítulo 6). Entre las bioactividades estudiadas, los resultados anti-elastasa mostraron una variación significativa entre las muestras de diferentes años, por lo que se realizó un fraccionamiento guiado por ensayos biológicos para identificar las características discriminantes responsables de esta variación, seguido de la purificación y elucidación estructural del compuesto responsable. Notablemente, una de las subfracciones purificadas mostró una mejora diez veces mayor en la eficacia de inhibición de la elastasa de neutrófilos en comparación con el extracto crudo; su efectividad se encontró dentro del mismo rango que SPCK, un potente inhibidor irreversible de elastasa. En general, esta subfracción también presentó mejores propiedades antioxidantes e inhibidoras de enzimas (colagenasa y tirosinasa) que el extracto crudo sin mostrar fototoxicidad y citotoxicidad contra diferentes líneas celulares de la piel. Tras la validación estructural mediante RMN, esta subfracción se elucidó como un compuesto formado por una base de glucogalina, que muestra resonancias espectrales características similares a las de la pedunculagina. Sin embargo, la fracción purificada parece tener una mezcla de isómeros con diferencias en la glucosa, lo que podría indicar que el compuesto antienvejecimiento encontrado en C. hypocistis podrían ser isómeros configuracionales de la pedunculagina. El trabajo desarrollado en la presente tesis caracterizó de manera integral la especie poco explorada C. hypocistis, ofreciendo perspectivas sobre su uso como alimento en tiempos de hambruna en el pasado y como fuente de compuestos con un amplio espectro de propiedades bioactivas. Además, fue posible identificar la clase de compuestos de máxima relevancia para sus bioactividades, validar su biosíntesis exclusiva dentro del parásito y maximizar su recuperación. Finalmente, C. hypocistis confirmó su potencial como fuente de compuestos antienvejecimiento, revelando excelentes propiedades antioxidantes e inhibidoras de enzimas, especialmente su actividad anti-elastasa de neutrófilos. 2023-11-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/157092 [EN] Introduction: Studies on African medicinal plants have been limited to some geographically areas, and even though many native plants are recognized and documented, other valuable medicinal plant species have not been studied. Angola has an important socio-cultural diversity and is one of the richest floristic regions of the world. Objectives: This study aims to perform an ethnopharmacological study in the Province of Cuanza Norte (Angola); also, a review of ethnobotanical studies from Angola Provinces; and finally, to perform a pharmacological evaluation (antioxidant, antibacterial and cytotoxic) of plant extracts selected from the Province of Cuanza Norte (Angola). Methods: At first it was performed an ethnopharmacological study in order to document the use of medicinal plants from the Province of Cuanza Norte (Angola). The field work was conducted from December 2018 to January 2019 and informants were selected in accordance with community recognition as traditional healers. Medicinal plants were listed along with their popular name, traditional use, part used, and method of preparation. The second part of the work aimed to perform a review of ethnobotanical studies from Angola. To achieve this objective a literature review search was carried out in PubMed, ScienceDirect, and Google Scholar databases, with no data restriction, in Portuguese and English languages. Ethnobotanical studies which collected information based on field work and on different traditional medicinal uses of plants from municipalities and provinces of Angola, were included. Therefore, from the plants listed in the field work performed by us and from the plants listed in the review of ethnobotanical studies, three medicinal plants were selected for further analysis, based on their importance in the country, published studies, and their traditional uses. Finally, the last part of the work aims to evaluate in vitro antioxidant, antibacterial and cytotoxicity activities of the selected plants: Adansonia digitata, Garcinia kola, and Gardenia ternifolia. In the experimental study it was used aqueous and methanolic extracts of the three African medicinal plants selected. Total phenolic content (TPC), total flavonoid content (TFC), and in vitro antioxidant activity were investigated. Also, their cytotoxic activity against HepG2 cell line, and antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, were assessed. Results: For the ethnopharmacological study, a total of 131 species of medicinal plants were cited by the informants of Cuanza Norte. Mukumbi (Lannea welwitschii), Santa Maria (Chenopodium ambrosioides) and Ditumbata (Boerhavia difusa) were the most cited species, following by Embondeiro (Adansonia digitata), Papaia (Carica papaya), and Mbrututu (Cochlospermum angolense). Informants were contacted through “snowball” method and through semi-structured interviews. Leaves were the most frequently material used, and maceration the major form of plants preparation. The main categories of use were infectious and parasitic diseases (e.g., Malaria); undefined pains and illness; diseases of the digestive system; and endocrine, nutritional, and metabolic diseases (e.g., Diabetes). It is also important to inform that some of the traditional indications are supported by data from scientific literature. Regarding the review of ethnobotanical studies performed in Angola, 7 ethnobotanical studies were found from 6 Provinces (Bié, Bengo, Huíla, Cuanza Norte, Namibe, Uíge). In some cases, informants were contacted through “snowball” method and through semi-structured interviews. In general, informants were persons who were known within the community for having high knowledge and experience about the use of plants.In the studies analyzed, the majority of the plants cited by the informants were not endemic to Angola, which may be related to the high deforestation rate in Africa. Some of the predominant families in the studies analyzed were Fabaceae, Asteraceae and Euphorbiaceae. Leaves were the predominant used plant part in the studies and decoction was the most common found method of plants preparation. The majority of the plants are used traditionally for digestive disorders. Some authors showed that few studies have been conducted for some plant species, including for G. ternifolia. Some authors also revealed that A. digitata can be used for different purposes, showing the high importance for the Angolan population. Therefore, because of the high importance of A. digitata in Angola, and the small numbers of studies regarding G. kola and G. ternifolia, those were the plants selected for further in vitro pharmacological studies. Regarding the in vitro antioxidant activity of A. digitata, G. kola, and G. ternifolia, IC50 values ranged from 6.1 ± 0.1 to 846.0 ± 20.9 µg/mL. G. kola methanolic extract showed the best TPC (131.4 ± 5.7 mg GAE/g) and the one of A. digitata showed the best TFC (46.0 ± 5.0 mg QE/g). Methanolic extracts showed higher TPC, TFC and antioxidant activity in general, compared to aqueous extracts. Considering the antibacterial activity, methanolic extracts of G. kola and G. ternifolia had the lowest MIC value of 0.625 mg/mL against Gram-positive S. aureus. Regarding cytotoxic activity for HepG2, A. digitata and G. kola extracts presented no cytotoxicity at any of the tested concentrations (5-500 µg/mL). Conclusions: Preserving the ethnobotanical knowledge in order to protect the biodiversity and to discover new therapeutic molecules is crucial in countries like Angola, where the traditional medicine plays an important role in their health care system. The results found in this work highlight the therapeutic potentiality of African flora and provide preliminary knowledge about the selected medicinal plants, partly explaining their use in the traditional medicine practice of Angola and other African countries. [ES] Introducción: Los estudios sobre plantas medicinales africanas se han limitado a algunas áreas geográficas, y aunque se reconocen y documentan muchas plantas nativas, no se han estudiado otras especies de plantas medicinales valiosas. Angola tiene una importante diversidad sociocultural y es una de las regiones de mayor riqueza florística del mundo. Objetivos: Este trabajo tiene como objetivo realizar un estudio etnofarmacológico en la Provincia de Cuanza Norte (Angola); realizar una revisión de los estudios etnobotánicos de las provincias de Angola; y finalmente llevar a cabo una evaluación farmacológica (antioxidante, antibacteriana y citotóxica) de extractos de plantas selecionadas de la Provincia de Cuanza Norte (Angola). Métodos: En un primer momento se realizó un estudio etnofarmacológico con el fin de documentar el uso de plantas medicinales de la Provincia de Cuanza Norte (Angola). El trabajo de campo se realizó de diciembre de 2018 a enero de 2019 y los informantes fueron seleccionados de acuerdo con el reconocimiento de la comunidad como curanderos. Las plantas medicinales se enumeraron junto con su nombre popular, uso tradicional, parte utilizada y método de preparación. La segunda parte del trabajo tenía como objetivo realizar una revisión de los estudios etnobotánicos de Angola. Para lograr este objetivo se llevó a cabo una revisión bibliográfica en las bases de datos PubMed, ScienceDirect y Google Scholar, sin restricción de datos, en los idiomas portugués e inglés. Se incluyeron aquellos estudios etnobotánicos que recopilaban información, a partir de trabajo de campo, sobre diferentes usos medicinales tradicionales de las plantas de municipios y provincias de Angola. De las plantas listadas en el trabajo de campo realizado por nosotros y de las plantas enumeradas en la revisión de estudios etnobotánicos, se seleccionaron tres plantas medicinales para su posterior análisis, en función de su importancia en el país, los estudios publicados y sus usos tradicionales. Finalmente, la última parte del trabajo consistió en evaluar in vitro las actividades antioxidantes, antibacterianas y de citotoxicidad de las plantas seleccionadas: Adansonia digitata, Garcinia kola y Gardenia ternifolia. En el estudio experimental se utilizaron extractos acuosos y metanólicos de las tres plantas medicinales africanas seleccionadas. Se estudió el contenido fenólico total (TPC), el contenido total de flavonoides (TFC) y la actividad antioxidante in vitro. Además, se evaluó su actividad citotóxica frente a la línea celular HepG2 y su actividad antibacteriana contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus. Resultados: En nuestro estudio etnofarmacológico se citaron un total de 131 especies de plantas medicinales por parte de los informantes de Cuanza Norte. Mukumbi (Lannea welwitschii), Santa María (Chenopodium ambrosioides) y Ditumbata (Boerhavia difusa) fueron las especies más citadas, seguido de Embondeiro (Adansonia digitata), Papaia (Carica papaya), y Mbrututu (Cochlospermum angolense). Los informantes fueron contactados a través del método de “bola de nieve” y a través de entrevistas semiestructuradas. Las hojas fueron el material más utilizado y la maceración la principal forma de preparación de la planta. Las principales categorías de uso fueron enfermedades infecciosas y parasitarias (p. ej., paludismo); dolor y enfermedades indefinidos; enfermedades del sistema digestivo; y enfermedades endocrinas, nutricionales y metabólicas (p. ej., diabetes). Es importante mencionar que algunas de las indicaciones tradicionales están respaldadas por datos de la literatura científica. En cuanto a la revisión de los estudios etnobotánicos realizados en Angola, se encontraron 7 estudios etnobotánicos de 6 Provincias (Bié, Bengo, Huila, Cuanza Norte, Namibe, Uíge). En algunos casos, los informantes fueron contactados a través del método de “bola de nieve” y también a través de entrevistas semiestructuradas. Por lo general, los informantes eran personas que se conocían dentro de la comunidad por tener un alto conocimiento y experiencia en el uso de las plantas. En los estudios analizados, la mayoría de las plantas citadas por los informantes no eran endémicas de Angola, lo que puede estar relacionado con la alta tasa de deforestación en África. Algunas de las familias predominantes en los estudios analizados fueron Fabaceae, Asteraceae y Euphorbiaceae. Las hojas fueron la parte de la planta más usada en los estudios y la decocción el método de preparación de plantas más común. La mayoría de las plantas se utilizan tradicionalmente para trastornos digestivos. Algunos autores mostraron que hay especies de plantas para las que se han realizado pocos estudios, entre ellas G. ternifolia. También se encontraron estudios que indicaban que A. digitata puede ser utilizada con diferentes propósitos, siendo de gran importancia para la población angoleña. Por lo tanto, debido a la gran importancia de A. digitata en Angola y a los pocos estudios encontrados sobre G. kola y G. ternifolia, esas fueron las plantas seleccionadas para posteriores estudios farmacológicos in vitro. En cuanto a la actividad antioxidante in vitro de A. digitata, G. kola y G. ternifolia, los valores de IC50 oscilaron entre 6,1 ± 0,1 y 846,0 ± 20,9 µg/mL. El extracto metanólico de G. kola presentó el mejor TPC (131,4 ± 5,7 mg GAE/g) y el de A. digitata presentó el mejor TFC (46,0 ± 5,0 mg QE/g). Los extractos metanólicos mostraron mejores valores de TPC, TFC y actividad antioxidante en general, en comparación con los extractos acuosos. En lo quese refiere a la actividad antibacteriana, los extractos metanólicos de G. kola y G. ternifolia presentaron el valor MIC más bajo de 0,625 mg/mL frente a S. aureus grampositivo. En cuanto a la actividad citotóxica frente a HepG2, los extractos de A. digitata y G. kola no presentaron citotoxicidad en ninguna de las concentraciones ensayadas (5-500 µg/mL). Conclusiones: Preservar el conocimiento etnobotánico para proteger la biodiversidad y descubrir nuevas moléculas terapéuticas es crucial en países como Angola, donde la medicina tradicional juega un papel importante en su sistema de salud. Los resultados de este trabajo destacan la potencialidad terapéutica de la flora africana y proporcionan un conocimiento preliminar sobre las tres plantas medicinales seleccionadas, que justifica en parte su uso en la medicina tradicional de Angola y de otros países africanos. 2023-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/153297 [EN]The following objectives were the main goals of this thesis: (i) provide an improved understanding of fermented papaya nutritional and health applications; (ii) find out commercial papaya fermented formulation available in the market; (iii) carry out a preliminary study to determine which conditions contribute to improving the pyruvic acid content and verify if there is any change after freezing preservation; (iv) screen the antioxidant and other properties of the products obtained by a variety of fermentation cycles, as well as the impact of adding Gluconobacter oxydans on their physicochemical properties; and (v) to developed and validate a high-performance liquid chromatography (HPLC) for determining six phenolic compounds (gallic acid, chlorogenic acid, caffeic acid, rutin, naringin and quercetin) in fermented papaya samples, in order to analyse the effect on the concentration of phenolic compounds present in fermented papaya with and without bacteria bioinoculation. [ES]Las principales metas de esta tesis se concretaron en los siguientes objetivos: (i) proporcionar una mejor comprensión de las aplicaciones nutricionales y de salud de la papaya fermentada; (ii) analizar las formulaciones comerciales de papaya fermentada disponibles en el mercado; (iii) realizar un estudio preliminar para determinar qué condiciones contribuyen a mejorar el contenido de ácido pirúvico y verificar si existe algún cambio después de la congelación; (iv) evaluar las propiedades antioxidantes y de otro tipo en los productos obtenidos mediante una variedad de ciclos de fermentación, así como el impacto de agregar Gluconobacter oxydans en sus propiedades fisicoquímicas; y (v) desarrollar y validar una cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para la determinación de seis compuestos fenólicos (ácido gálico, ácido clorogénico, ácido cafeico, rutina, naringina y quercetina) en muestras de papaya fermentada, con el fin de analizar el efecto sobre la concentración de compuestos fenólicos presentes en papaya fermentada con y sin bioinoculación bacteriana. 2023-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/153252 [EN]To achieve the thesis goals, two original articles were performed, the first to evaluate patients’ awareness of ADR risks and the Portuguese Pharmacovigilance System and the second to provide a retrospective analysis of ADR to iopromide in a Portuguese private unit of radiology. In addition, to reinforce the background of the thesis, two review articles were incorporated: a narrative review of the safety assessment of iopromide focusing on adverse events and a scoping review of all-round approaches to increase adverse drug reaction reporting. [ES]Para lograr los objetivos de la tesis, organizada en compendio de artículos, se realizaron dos artículos originales, uno para evaluar el conocimiento de los pacientes sobre los riesgos de RAM y el Sistema de Farmacovigilancia de Portugal y otro para proporcionar un análisis retrospectivo de RAM a iopromida en una unidad privada de radiología portuguesa. Además, para reforzar los antecedentes de la tesis, se agregaron dos artículos de revisión, uno que utiliza una revisión narrativa de la evaluación de la seguridad de la iopromida que se centra en los eventos adversos y una revisión de alcance de enfoques integrales para aumentar la notificación de reacciones adversas a medicamentos. 2023-01-01T00:00:00Z