http://hdl.handle.net/10366/4199 2026-04-23T18:31:29Z http://hdl.handle.net/10366/160425 [ES] En este Trabajo de Doctorado se plantea la búsqueda de nuevas moléculas activas, aisladas de fuentes naturales de origen vegetal, para el tratamiento de la Leishmaniasis. Basándose en el conocimiento de la Medicina Tradicional Maya, contenida en los libros sagrados “Chilam Balam” y “Popol Vuh”, se seleccionaron las especies descritas para el tratamiento de enfermedades transmitida por la picadura de mosquitos, unas 16 especies de plantas, de ellas, 5 (Hylocerus undatus, Bauhinia divaricata, Euphorbia hirta, Ruellia nudiflora, y Cedrela odorata) se ensayaron in vitro frente a amastigotes axénicos de Leishmania mexicana. Todas a excepción de B. divaricata mostraron inhibición del crecimiento del parásito con IC50 comprendida entre 122,5 y 14,8 μg/mL. Se realizó el fraccionamiento con disolventes de polaridad creciente (n-Hex, CHCl3 y AcOEt) de Cedrela odorata y Euphoria hirta, siendo la fracción más activa la de CHCl3 de E. hirta con IC50 = 1,7 μg/mL, por lo que se purificó en cromatografía de columna (CC) aislando e identificando tres flavonoles quercetina (110), miricetina (111) y kaempferol (112) y la cumarina escopoletina (113), de ellos 110 fue la más activa con IC50 = 2,92 μM. Adicionalmente, se realizó el estudio de la actividad leishmanicida de Tridax procumbens L., planta usada en la medicina tradicional Maya para el tratamiento de enfermedades parasitarias, entre otras dolencias. En este caso, la preparación del extracto se realizó usando fluidos supercríticos (CO2), y se analizó el efecto de las distintas variables: presión, temperatura y tiempo de extracción en relación al mejor rendimiento en extracto, que fueron 200 bar, 40 ºC y 4,5 h, (cantidad de extracto obtenida 0,2230 mg/g). El extracto se fraccionó con eluyentes de polaridad creciente, y de la fracción de CHCl3 se aisló por CC 1,18 g del (3S)-16,17-dideshidrofalcarinol (18), compuesto que mostró excelentes propiedades leishmanicidas con IC50 = 0,74 μM. Por otro lado, y dado que el compuesto 18 fue el más activo, se puso a punto un método de síntesis aplicando principios de química verde, que implica la formación de dos sintones, el A (8 etapas de reacción) y el B (1 etapa), que se unen por un acoplamiento cruzado para obtener 18 en forma racémica con un 21% de rendimiento, que por purificación por HPLC proporciona el (3S)-16,17-dideshidrofalcarinol (18). Todos los compuestos obtenidos han sido purificados mediante técnicas cromatográficas, y caracterizados por sus propiedades físico-químicas y espectroscópicas: IR, HR-MS, RMN 1H y RMN 13C. [EN] The aim of this doctoral thesis was the search for new active molecules, isolated from plant sources, for the treatment of Leishmaniasis. Based on the knowledge of Traditional Mayan Medicine, contained in the sacred books "Chilam Balam" and "Popol Vuh", the species described for the treatment of diseases transmitted by mosquito bites were selected, about 16 species of plants, 5 of them (Hylocerus undatus, Bauhinia divaricata, Euphorbia hirta, Ruellia nudiflora, and Cedrela odorata) were tested in vitro against axenic amastigotes of Leishmania mexicana. All except B. divaricata showed inhibition of parasite growth with an IC50 ranging from 122.5 to 14.8 μg/mL. Partition was performed with solvents of increasing polarity (n-Hex, CHCl3 and AcOEt) of Cedrela odorata and Euphoria hirta, with the most active fraction being the CHCl3 of E. hirta with IC50 = 1,7 μg/mL, therefore it was purified by column chromatography (CC) isolating and identifying three flavonols quercetin (110), myricetin (111) and kaempferol (112) and the coumarin scopoletin (113), of which quercetin was the most active with IC50 = 2.92 μM. Additionally, a bioguided assay was conducted on the leishmanicidal activity of Tridax procumbens L., a plant used in traditional Mayan medicine for the treatment of parasitic diseases, among other ailments. In this case, the preparation of the extract was carried out using supercritical fluids (CO2), and the effect of the different variables: pressure, temperature and extraction time was analyzed in relation to the best extract yield, which was 200 bar, 40 ºC and 4,5 h, (amount of extract obtained 0,2230 mg/g). The extract was fractionated with eluents of increasing polarity, and from the CHCl3 fraction 1,18 g of (3S)-16,17-dideshydrofalcarinol (18), a compound that showed excellent leishmanicidal properties with IC50 = 0,74 μM, was isolated by CC. On the other hand, and since compound 18 was the most active, a synthesis method was adjusted by applying green chemistry principles, involving the formation of two synthons, A (with 8 reaction steps) and B (1 step), which were combined by a crosscoupling reaction to obtain 18 in racemic form in 21% yield, which by HPLC purification provides the enantiomer (3S)-16,17-dideshydrofalcarinol (18). All the compounds obtained have been purified by chromatographic techniques and crystallization in some cases, and characterized by physicochemical and spectroscopic properties: IR, HR-MS, 1H-NMR and 13C-NMR. 2024-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/135734 [ES] El abuso y dependencia de sustancias psicoactivas constituyen un problema prioritario de salud pública que se pone de manifiesto subjetivamente en el hecho de que las drogas se encuentran entre los problemas que más preocupan a la sociedad actual y se confirma mediante los datos epidemiológicos. Las consecuencias del consumo de drogas son graves tanto para el individuo como para la sociedad, tanto en términos sanitarios como socioeconómicos, y las soluciones a este problema se escapan de la capacidad de los individuos afectados, debiendo ser asumidas por la sociedad. Para esta investigación se ha requerido de un enfoque epidemiológico, cuyo objetivo es describir las relaciones entre el problema de salud y las características geográficas básicas como edad, género o localización geográfica. Para esta investigación se han utilizado dos tipos de fuentes de información: - Sistemas basados en registros oficiales - Sistemas basados en datos de entrevistas personales o exámenes realizados a determinada población; [EN]Knowledge of drug use, particularly in Spain, but also in Europe and wolrdwide, comes from epidemiological surveys carried our in general or specific populations more than from objective analytical data. Hair testing enables a retrospective identification of long-term use, thus becoming a routine procedure in Forensic Toxicology. As a result, large datasets of drug tests in hair are available for statistical analysics, which is a very suitable approach to obtain insights about the target population and to improve the interpretation of results. This Doctoral Thesis delves into the knowledge of epidmiological patterns of drug use in the forensic context in a geographical area that comprises nine Spanish Autonomous Communities (Madrid incluede) and more than 19 million inhabitants. The study focuses on a set of more than 5000 tests performed on head hair samples from the Medico-Legal sector at the Madrid Department of the Spanish National Institute of Toxicology and Forensica Sciences during the period 2013-2015. Tests are carried out on judicial request, wht the key aim of assessing the repeated use of drugs (cannabis, cocaine, heroin, ketamine and amphetamine derivatives) and/or substitution treatment drugs (methadone) by people involved in mostly criminal proceedings. the proportion of positivie results and the distribution of quantitativa results are assessed in relation to genter, age, geographical origin, cosmetic treatment and natural pigmentation of hair, and length of the tested sample. Finally, the trends of drug use patterns through the three-year period are evaluated. The study of prevalence of drug use in the forensic field proviedes a systematic approach to the knowledge of high-risk drug use. Epidemiological information revealed through hair analysis for legal purposes is particularly relevant in the case of substances with low prevalence of consumption in general population, as as regarding poly-drug use. Thus Forensic Epidemiology allows the orientation of Forensic Toxicology towards Public Health in order to have a positive impact on national policies and practices of prevention of drug use and minimization of its effects. 2017-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/127356 [ES]El cáncer es una de las principales causas de mortalidad y el número de casos detectados va en aumento. Se considera uno de los temas más destacados en el mundo de la investigación científica y cada año se desarrollan miles de compuestos antitumorales para ver si pueden llegar a frenar esta enfermedad. Una de las familias de agentes antimitóticos que tiene una potencia inhibidora importante frente a la polimerización de la tubulina en el sitio de la colchicina son las combretastatinas. La CA-4 presenta una actividad muy interesante por lo cual se puede considerar como molécula base para el desarrollo de análogos más potentes y que puedan mejorar la relación estructura actividad (REA) para este tipo de derivados. Los principales problemas estructurales de CA-4 son la baja solubilidad acuosa y la rápida isomerización del doble enlace cis a trans. En nuestro grupo de trabajo, se han realizado numerosas modificaciones dirigidas a paliar esta problemática cambiando la naturaleza de los dos anillos aromáticos o los sustituyentes que contienen y el puente que los une. En este trabajo se ha llevado a cabo la síntesis de nuevos análogos nitrogenados de combretastatina, fenstatina e isocombretastatina en los que se han introducido en los anillos aromáticos grupos nitrogenados con el fin de aumentar la potencia inhibitoria de polimerización de tubulina y la solubilidad acuosa de los mismos. La estrategia seguida ha sido combinar en los dos anillos aromáticos A y B sustituyentes oxigenados con los nitrogenados, los cuales podrían unirse de forma similar a la tubulina y potenciar la solubilidad. Para ello se han sintetizado derivados de piridina o bencénicos sustituidos con grupos metil- o- dimetilamino, pirrolidino, conjuntamente y utilizando la reactividad de la molécula se han introducido funciones polares adicionales. Se ha determinado la solubilidad acuosa de los compuestos sintetizados, comprobándose un incremento considerable respecto a las de CA-4. Además, de la mayor parte de los compuestos finales sintetizados se ha determinado la actividad inhibitoria de polimerización de tubulina, observándose que de las modificaciones realizadas en el anillo B solamente la isocombretastatina con anillo de p-dimetilaminofenilo posee una actividad similar a la de CA-4. Sin embargo, la sustitución de uno de los metoxilos del anillo A por un grupo amino libre o metilado conduce a compuestos de igual o mayor potencia que la CA-4 y que poseen una mayor solubilidad acuosa, lo cual hace que estos compuestos sean candidatos para continuar la investigación. Una serie de compuestos sintetizados en este trabajo han sido evaluados como citotóxicos frente a tres líneas celulares cancerosas (HeLa, HT29, HL60). 2015-03-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/127298 [ES]El cáncer es una de las enfermedades con mayor mortalidad a nivel mundial, por ese motivo, durante los últimos años se han desarrollado multitud de compuestos antitumorales con capacidad para frenar la división anormal de estas células. La Combretastatina A-4 es uno de los compuestos con estructura más sencilla y mayor potencia capaces de unirse a la tubulina en el sitio de unión de la colchicina, causando la muerte celular mediante la inhibición de la polimerización de esta proteína. Dos de los principales inconvenientes que presenta la CA-4 es su baja solubilidad acuosa y la inestabilidad del doble enlace cis, por este motivo, en nuestro grupo de investigación se diseñan, sintetizan y evalúan análogos de combretastatinas en los que diferentes anillos aromáticos se unen por un puente de un solo átomo en sustitución del doble enlace cis, de manera que se puedan solventar ambos inconvenientes. En este trabajo nos hemos centrado en la síntesis y evaluación de fenstatinas e isocombretastatinas con anillos de piridina, en sustitución del anillo de trimetoxifenilo de la CA-4 que hasta ahora se consideraba indispensable para la actividad, en un intento de mejorar tanto la potencia como la solubilidad acuosa. Sobre dicha estructura base, también se han realizado modificaciones en el otro anillo aromático, que se ha reemplazado por p-metoxifenilo o N-metilindolilo, habiendo procedido a la introducción de grupos amino, aldehídos, nitrilos, oximas, etc. La actividad de estos compuestos ha sido evaluada in vitro mediante ensayos de inhibición de polimerización de tubulina, y ensayos de citotoxicidad sobre cultivos celulares tumorales (Hela, HT29, HL60). Así mismo, también se ha determinado la solubilidad acuosa de los compuestos. 2014-12-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/124046 [ES] Las investigaciones llevadas a cabo durante la realización de este trabajo de Tesis Doctoral, están orientadas hacia el diseño molecular, la síntesis química de sustancias bioactivas y el análisis de los resultados de su bioevaluación, para establecer relaciones entre las estructuras y la actividad en los ámbitos de utilidad terapéutica contemplados. En esta memoria se describe la puesta a punto de diferentes metodologías y procedimientos para obtener derivados de 2-aminohexadecanol, 1-aminohexadecan-2-ol y hexadecano-1,2-diaminas. El primer grupo de compuestos partiendo del acetamidomalonato de dietilo o del ácido 2-bromohexadecanoico. El segundo, por apertura de tetradeciloxirano, Y las diaminas, a partir de un intermedio de la ruta empleada en el primer grupo. Los intermedios de reacción se acilaron para obtener un amplio grupo de compuestos que fueron ensayados en siete tipos de actividades. También se ha puesto a punto un método de obtención de carbamatos utilizando cloruro de oxalilo. Se describe, así mismo, los intentos de resolución disteromérica/enantiomérica por formación de amidas, sales y ésteres de los derivados más activos. Los compuestos preparados fueron remitidos a centros especializados para su evaluación preliminar y subsiguiente, en los ámbitos de citotoxicidad antineoplásica (P-388, A-549, HT-29 y MEL 28), muerte celular (indución de apoptosis), inmunomodulación, anti-inflamación (inhibición de cPLA2, sPLA2 y ensayos in vivo), micosis (Candida Cryptococcus, Saccharomyces, Aspergillus, Microsporum, Epidermophyton, Trichophyton), actividad antiparasitaria (estudios preliminares frente L. amazonensis (PH8), L. brasilensis (2903), L. donovani (PP75)), y actividad antibacteriana (Mycobacterium tuberculosis: H37Rv y CIBIN-9; tomando Etambutol como referencia). En cada tipo de ensayo ha mostrado actividad un compuesto diferente. Los intermedios de reacción se acilaron para obtener un amplio grupo de compuestos que fueron ensayados en siete tipos de actividades. También se ha puesto a punto un método de obtención de carbamatos utilizando cloruro de oxalilo. Se describe, así mismo, los intentos de resolución disteromérica/enantiomérica por formación de amidas, sales y ésteres de los derivados más activos. 2013-10-18T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/122914 [ES] Se propuso el diseño de compuestos relacionados con la Esfingosina y Etambutol (EMB), es así que se sintetizaron 136 compuestos de familias diversas, entre ellas compuestos derivados de 2-aminoalcan-1-oles, 1,2-alcanodiaminas, 1-aminoalcan-2-oles y compuestos derivados de EMB. también se obtuvieron compuestos derivados de los compuestos 1-aminoalcan-2-oles enantioméricamente puros. Todos estos compuestos fueron obtenidos, purificados y caracterizados convenientemente para luego ser ensayados sobre cepas de M. tuberculosis (una sensible a los fármacos de primera linea y una resistente a todos ellos). también se llevaron a cabo 7 diferentes tipos de bioensayos sobre diferentes dianas biologicas basados en antecedentes del grupo de investigación, es así que los compuestos fueron ensayados también, para: Actividad anti Trypanosoma brucei y cruzi, actividad anti Leishmanicida, actividad moduladora de la producción de óxido nítrico, actividad antifúngica fitopatogénica, actividad antinociceptiva y actividad antitumoral. Es así que se encontraron diversos compuestos con actividad sobre todas estas actividades y se logró realizar análisis de estructura y actividad biológica para los compuestos más activos. En los ensayos de actividad antituberculosa, se observaron cuatro compuestos con buena actividad, de estos uno fue más activo con valores de 1,56 ug/mL que al ser comparado con el fármaco control EMB (CMI = 10 uM; 7 ug/mL aprox), fue mucho más potente. Mientras que para los ensayos de trypanosoma brucei se encontraron 3 compuestos con buena actividad sobre el párasito, provocando un fenomeno de muerte de este llamado "Ojo grande". En el caso de los ensayos frente a T. cruzi, 7 de los compuestos ensayados resultaron ser más potentes que el fármaco control benznidazol. Para los ensayos de la modulación de NO, 3 compuestos presentaron mejores valores de inhibición de la producción de NO. Para los ensayos sobre Leishmania donovani, 1 compuesto presentó valores más potentes de actividad. Para los ensayos de actividad antifúngica fitopatogénica, 1 compuesto fue el que mejor actividad tuvo al ser comparado con el pesticida control y finalmente para los ensayos antitumorales 2 compuestos fueron activos sobre las 3 lineas tumorales. Muchos de estos resultados son preliminares y siguen en estudios posteriores.; [EN] One proposed the design of compounds related to the Esfingosina and Etambutol (EMB), it is so there were synthesized 136 compounds of diverse families, between them derivative compounds of 2-aminoalcan-1-oles, 1,2-alcanodiaminas, 1-aminoalcan-2-oles and compounds derived from EMB. also obtained compounds derived from the compounds 1-aminoalcan-2-oles enantioméricamente cigars. All these compounds were obtained, purified and characterized suitably then to there be tested on vine-stocks of M. tuberculosis (one sensitive to the medicaments of the first line and one resistant to all of them). Also 7 different types were carried out of bioensayos on different biological reveilles based on precedents of the group of investigation, it is so the compounds were tested also, for: Activity anti Trypanosoma brucei and cruzi, activity anti Leishmanicida, modulating activity of the production of nitric oxide, activity antifúngica fitopatogénica, activity antinociceptiva and antitumoral activity. It is so they found diverse compounds with activity on all these activities and it was achieved to realize analysis of structure and biological activity for the most active compounds. 2013-06-28T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/76563 [ES] Podofilotoxina y ciclolignanos relacionados son compuestos que se utilizan como agentes anticancerosos y como precursores para el desarrollo de nuevos fármacos. Uno de estos derivados es el aldehído podofílico (9-desoxi-9-oxo-α-apopicropodofilato de metilo), un ciclolignano no lactónico obtenido por nuestro grupo de investigación que presenta interesantes propiedades citotóxicas selectivas frente a cáncer de colon, lo que le ha convertido en nuestro “cabeza de serie” para la búsqueda y preparación de nuevas series de compuestos con actividad citotóxica selectiva. Así, en este trabajo de tesis doctoral se aborda la preparación de nuevos derivados del aldehído podofílico por modificación de los grupos funcionales presentes en las posiciones C-9 y C-9’. Se han preparado compuestos que presentan distintas combinaciones de aldehído, imina o amina en C-9 y éster o amida en C-9’, utilizando como metodologías sintéticas la esterificación con derivados bromados en medio básico, la aminolisis de la lactona de podofilotoxina y diferentes reacciones de aminación reductora de aldehídos. Además, y puesto que la hibridación es una estrategia muy utilizada para la obtención de nuevos agentes quimioterápicos, se ha preparado una nueva familia de híbridos de ciclolignanos derivados del aldehído podofílico y purinas diferentemente funcionalizadas. Ambos fragmentos se han unido a través de la posición C-9’ del lignano, que incluye una función éster, y del nitrógeno N-9 (N-7) de la purina, utilizando para ello espaciadores dibromados alifáticos o aromáticos y diferentes estrategias sintéticas en función de si el espaciador se une primero al ciclolignano o a la purina. Igual que para los compuestos anteriores, se han preparado híbridos que presentan aldehído, imina o amina en C-9. Los compuestos sintetizados han sido evaluados como citotóxicos frente a diferentes líneas celulares neoplásicas humanas (A-549, MB-231 y HT-29), mostrando, en general, una potencia citotóxica igual o superior a la del “cabeza de serie” y algunos una interesante selectividad frente a HT-29. Se ha evaluado, además, el efecto de los análogos no híbridos sobre el ciclo celular y la capacidad de alteración de los microtúbulos en células HT-29, demostrándose la existencia de dos mecanismos de acción diferentes para compuestos con estructuras muy similares.; [EN] Podophyllotoxin and related cyclolignans are widely used in the clinical treatment of malign neoplasms, being also good candidates for the design and synthesis of more potent, less toxic and more selective derivatives. Podophyllic aldehyde (methyl 9-deoxi-9-oxo-α- apopicropodophyllate) is a non-lactonic semisynthetic cyclolignan prepared by our group that showed a very interesting selective cytotoxic activity against colon carcinoma HT-29, becoming the “lead compound” for the preparation of new analogues. Thus, new series of derivatives have been prepared in this Thesis work by modifications on the substituents at the C-9 and C-9’ positions of the cyclolignan skeleton. Compounds presenting different combinations of aldehyde, imine or amine at C-9 and ester or amide functions at C-9’ have been synthesised using different synthetic strategies, such as esterification with bromides under basic conditions, aminolisis of the lactone and reductive amination of aldehydes. In addition, and due to the fact that hybridisation is a commonly used strategy in the search of new anticancer agents, a new family of compounds has been prepared by conjugation between podophyllic aldehyde derivatives and differently substituted purines. The junction of the two molecules was done through the C-9’ position of the lignans and the N-9 (N-7) position of the purines, using aliphatic or aromatic linkers. The target compounds can be obtained through two main synthetic strategies, depending if the linker was attached first to the lignan derivative or to the purine system, and two different functionalities will be also considered at the C-9 position: aldehydes and amines. All compounds prepared have been evaluated against several human tumour cell lines (A-549, MB-231 and HT-29). Most of the derivatives maintained the potency of the “lead compound”, with GI50 values in the μM range, and some of them are several times more potent against HT-29 and A-549 carcinoma than against MB-231 melanoma cells. Cell cycle studies and analysis of the microtubule-disrupting capacity of non-hybridated analogues have demonstrated the existence of two different mechanisms of cell death induction for compounds with closely related structures. 2010-05-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/76213 [ES]Una de las estrategias empleadas en la lucha contra el cáncer es la búsqueda y desarrollo de nuevos fármacos capaces de inhibir la polimerización de tubulina y frenar, así, el crecimiento de las células cancerosas. En nuestro grupo de investigación se ha optado por la síntesis y evaluación de nuevos agentes antimitóticos capaces de unirse a la tubulina en el sitio de la colchicina. Tomando como referencia la combretastatina A-4, durante los últimos años se han realizado modificaciones en ambos anillos aromáticos y en el puente. La disposición cisoide de los anillos aromáticos es una de las características estructurales clave para mantener la actividad antimitótica en estos compuestos. En este trabajo se han seguido dos estrategias diferentes para conseguir este objetivo: • Sintetizar análogos macrocíclicos de combretastatina, que además restringen la movilidad de los anillos aromáticos. • Obtener compuestos con estructura de 1,1-diarileteno, isómeros de combretastatina que poseen la ventaja de no sufrir isomerizaciones cistrans. En todos estos compuestos se ha mantenido la presencia de un anillo de trimetoxifenilo, y se han introducido variaciones en el segundo anillo aromático. Principalmente se ha estudiado el efecto en la actividad que produce el empleo de restos Nmetil- 5-indolilo diferentemente sustituido en la posición C-3. Finalmente, se ha evaluado, in vitro, la capacidad inhibitoria de polimerización de tubulina de todos los compuestos obtenidos y su actividad citotóxica frente a cuatro líneas celulares neoplásicas (HL-60, A-549, HeLa y HT-29).; [EN]The search and development of new inhibitors of tubulin polymerization drugs that stop cancer cell growing, is one of the present strategies to fight against the cancer. Our research group has chosen for the synthesis and evaluation of new antimitotic agents that are able to bind to the tubulin in the colchicine site. In the last few years, several modifications of both aromatic rings and the bridge have been performed using the combretastatin A-4 as a model. Keeping the cisoid disposition of the rings is one of the structural keys to preserve the antimitotic activity. This Ph. D. work has followed two different strategies to reach this objective: • Synthesizing macrocyclic analogues of combretastatins, which also restrict the mobility of the aromatic rings. • Obtaining compounds with 1,1-diarylethene structure. These isomers of combretastatins have the advantage of not suffering cis-trans isomerizations. All these compounds have maintained a trimethoxyphenyl moiety and have different modifications on the other aromatic ring. Mainly, it has been studied the effect on the activity of several substitutions at the C-3 position of N-methyl-5-indolyl moiety. Finally, all the synthesized compounds have been assayed in vitro to check their tubulin polymerization inhibitory activity and their cytotoxicity against four neoplasic cell lines (HL-60, A-549, HeLa and HT-29). 2009-01-01T00:00:00Z