http://hdl.handle.net/10366/3905 Thu, 23 Apr 2026 19:29:36 GMT 2026-04-23T19:29:36Z http://hdl.handle.net/10366/145549 [EN] Plants have multiple chemical components which can be called active because they produce diverse effects or responses in the organism. Parasitism represents a serious public health problem, mainly in tropical and subtropical regions. From a pharmaceutical point of view, the use of extended-release systems is a critical parameter in their interaction with biological systems. The present study aimed to investigate the antiparasitic effects of methanolic extracts and their fractions, of Argemone mexicana and Kalanchoe daigremontiana (The parasites of clinical importance model studied were Entamoeba histolytica, richomonas vaginalis, Strongyloides venezuelensis, and Schistosoma mansoni), as well as their main active component, in in-vitro experiments. Also, it was investigated the cytotoxic and cytoprotective activity of the extracts, fractions, and active molecule in human erythrocytes. There were prepared methanolic extracts from leaves and dry stems of A. mexicana and K. daigremontiana, they were phytochemically characterized and fractionation was carried out with solvents of different polarity. Later, it was determined the percentage of viability and the average inhibitory concentration (IC50) being the methanolic leaf fraction the most effective with IC50 of 39, 56, and 15 μg/mL over E. histolytica, T. vaginalis, and S. venezuelensis respectively, for S. mansoni it was lethal at 50 μg/mL. The active fraction was analyzed by liquid chromatography (HPLC) coupled to mass spectrometry (MS) and the berberine alkaloid (Ber) was identified which presented IC50 of 3.3, 1.9, 5.8, and 1.7 respectively on E. histolytica, T. vaginalis, S. venezuelensis, and S. mansoni. Finally, it was determined the cytotoxic and cytoprotective capacity using the technique of hemolysis in erythrocytes. To nanoencapsulate the active molecule and obtain polymeric nanoparticles (NP) with a size ≤ 200 nm and polydispersity index (PDI) ≤ 0.2 and without cytotoxic effect. Eudragit EPO, E100, L100, and L100-55 polymers were used, which yielded particle sizes of 150, 200, 72.2, and 168 nm with a Ber encapsulation percentage of 72.3, 38.4, 47.1, and 17.6, respectively.; [ES] Las plantas poseen múltiples componentes químicos los cuales se pueden denominar como representan un grave problema de salud pública, principalmente en regiones tropicales y subtropicales. Desde el punto de vista farmacéutico, el uso de sistemas de liberación prolongada son un parámetro clave en su interacción con sistemas biológicos. El presente estudio tuvo como objetivo investigar los efectos antiparasitarios de extractos metanólicos y sus fracciones, de Argemone mexicana y Kalanchoe daigremontiana (Los parásitos de importancia clínica modelo estudiados fueron Entamoeba histolytica, Trichomonas vaginalis, Strongyloides venezuelensis y Schistosoma mansoni), así como de su principal componente activo, en experimentos in-vitro. También, se investigó la actividad citotóxica y citoprotectora de los extractos, fracciones y molécula activa en eritrocitos humanos. Se prepararon extractos metanólicos de hojas y tallos secos de A. mexicana y K. daigremontiana, se caracterizaron fitoquímicamente y se realizó fraccionamiento con solventes de distinta polaridad. Posteriormente, se determinó el porcentaje de viabilidad y la concentración inhibitoria media (IC50) siendo la fracción metanólica de hoja la más efectiva con IC50 de 39, 56 y 15 μg/mL sobre E. histolytica, T. vaginalis y S. venezuelensis respectivamente, para S. mansoni fue letal a 50 μg/mL. La fracción activa se analizó por cromatografía de líquidos (HPLC) acoplada a espectrometría de masas (MS) y se identificó el alcaloide berberina (Ber) el cual presento IC50 de 3.3, 1.9, 5.8 y 1.7 respectivamente sobre E. histolytica, T. vaginalis, S. venezuelensis y S. mansoni. Finalmente, se determinó la capacidad citotóxica y citoprotectora mediante la técnica de hemólisis en eritrocitos. Con el objeto de nanoencapsular la molécula activa y obtener nanopartículas poliméricas (NP) con tamaño ≤ 200 nm e índice de polidispersidad (PDI) ≤ 0.2 y sin efecto citotóxico. Se utilizaron polímeros Eudragit EPO, E100, L100 y L100-55 los cuales arrojaron tamaños de partícula de 150, 200, 72.2 y 168 nm con un porcentaje de encapsulación de Ber del 72.3, 38.4, 47.1 y 17.6 respectivamente. Wed, 01 Jan 2020 00:00:00 GMT http://hdl.handle.net/10366/145549 2020-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/139588 [ES]Las enfermedades con resistencia/sensibilidad poligénicas dependen de la suma de efectos de genes con efecto débil, que interactúan entre ellos y el ambiente, provocando que en las mismas condiciones unos individuos desarrollen enfermedad grave y otros no. Estos genes son difíciles de localizar en el hombre, por la heterogeneidad genética y la compleja interacción con el medio. Sin embargo, el ratón ofrece modelos simplificados de líneas puras y cruzamientos para la disección genética de rasgos complejos. El estudio se concibió para identificar los patofenotipos asociados a la infección por «Schistosoma mansoni» empleando un modelo de cruce retrógrado o «backcross». También se pretendió encontrar regiones cromosómicas (eQTL) implicadas en la susceptibilidad a la infección y ligadas a los patofenotipos definidos. Para generar el «backcross» (F2BX), se cruzaron hembras F1C57CBA con machos CBA/2J, para enriquecer nuestra cohorte en alelos de susceptibilidad. Los 120 ratones generados, se infectaron con 150 cercarias de «S. mansoni» y se necropsiaron a las 9 semanas postinfección. Se midieron magnitudes parasitológicas, patológicas e inmunológicas para obtener grupos o patofenotipos de enfermedad. El «backcross» mostró menor de número de vermes y huevos en hígado que el cruce F1C57CBA y más parecido en número de granulomas a la línea parental más susceptible (CBA/2J). Se observó que en el «backcross» no había diferencias entre ratones machos y hembras salvo en el número de granulomas. Mediante el estudio de K-medias y PCA y correlaciones entre las variables parasito-patológicas, se observaron cuatro niveles de gravedad. En el análisis de variación entre medias de los patofenotipos se observó asociación con el daño hepático, independientemente del número de vermes recuperados. Se realizó el genotipado de los ratones con 958 SNPs significativos y su asociación a los fenotipos. En conclusión, tras generar el «backcross», con gran heterogeneidad, para estudiar la influencia de la infección por «S. mansoni», los cuatro patofenotipos observados en la esquistosomosis mansónica experimental en un cruzamiento retrógrado, parecen relacionados con el daño hepático. Las poblaciones celulares tienen importancia en la progresión de la enfermedad y los niveles de anticuerpos no están asociados con la gravedad de la infección. De las 18 regiones cromosómicas eQTL encontradas, hay una en el cromosoma 18 de ratón relacionada con el daño hepático, homóloga con el cromosoma 18 humano, en la región 18q11.2-12.3. Mon, 01 Jan 2018 00:00:00 GMT http://hdl.handle.net/10366/139588 2018-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/137570 [ES] La amphimeriosis es una nueva enfermedad soonótica emergente que afecta a los humano y es causada por el parásito trematodo de vías biliares Amphimerus sp. perteneciente a la familia Opisthorchiidae, transmitido por la ingesta de peces de río crudos o poco cocinados. En el año 2011, reportamos altas tasas de prevalencia de infección en la población indígena Chachi que habita en áreas tropicales húmedas, rurales y remotas de la región noroccidente del Ecuador. Además,se evidenciaron altas tasas de infección en animales domésticos (perros y gatos) residentes en éstas comunidades. Se conoce muy poco sobre la sintomatología causada y el tratamiento de esta enfermedad. La detección microscópica de los huevos en heces, es el método actual para diagnosticar la infección en humanos y animales. Sin embargo, este método tiene baja sensibilidad y la morfología de los huevos puede confundir con otros trematodos hepáticos e intestinales presentes en las heces. Para mejorar la sensibilidad y especificidad del diagnóstico de desarrollaron y validaron un ensayo inmunoenzimático (ELISA) para detectar anticuerpos circulantes IgG anti-Amphimerus sp. y la técnica molecular tipo LAMP (Loop mediated isothermal amplification). Para el estudio del ELISA se utilizaron antígenos solubles totales del parásito adulto Amphimerus sp. Se aplicó la técnica en 219 sueros de personas infectadas y saludables. La sensibilidad y especificidad de la prueba fue de 85,0% y 71,0% respectivamente. Se encontró reactividad cruzada con Paragonimus mexicanus, Fasciola hepatica, Schistosoma spp, Taenia solium, Strongyloides stercoralis, Mansonella spp. y Vampirolepis nana. Para el estudio tipo LAMP, se amplificaron los 4 cebadores a partir de una secuencia de 459 pb del gen ITS2 de Amphimerus spp. se desarrolló una PCR convencional y un LAMP (LAMPhimerus). Se evaluaron las sensibilidades y especificidades tanto de la PCR como de LAMPhimerus. El límite de detección de ambas pruebas fue de 1 pg de ADN genómico. No hubo reacciones cruzadas con ADN de 19 parásitos utilizados, incluidos C. sinensis y O. viverrini. La evaluación en campo se realizó con 44 muestras de heces conservadas en alcohol al 80% la sensibilidad y especificidad para LAMPhimerus fue de 76,7% y 80,7%, respectivamente. Además se aplicó la técnica LAMPhimerus en 102 muestras de heces conservadas en papel de filtro común. Se obtuvo una sensibilidad de y una especificidad de 79.17% y una especificidad de 65.98%. Las pruebas ELISA y LAMPhimerus, resultaron eficientes para uso en condiciones de campo y podrían ser aplicadas en el diagnóstico clínico de esta nueva enfermedad infecciosa tropical desatendida emergente, en seguimientos post-tratamiento y en programas de control y vigilancia de la enfermedad humana y de los reservorios domésticos y silvestres. Mon, 01 Jan 2018 00:00:00 GMT http://hdl.handle.net/10366/137570 2018-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10366/137110 [EN] Identifying and characterising proteins which use Plasmodium merozoites to invade host cells represents an important strategy for developing a method for controlling these parasites. However, basic P. vivax research has been delayed due to difficulties in propagating it in vitro as the parasite prefers to invade reticulocytes; there is a low percentage of these in adult human peripheral blood (1%-2%) and they are difficult to obtain with high purity, in a sufficient amount and totally viable. Consequently, knowledge is scarce regarding the amount of molecules being expressed by P. vivax and which of them represent good candidates for inclusion in an effective vaccine. This study has been aimed at evaluating the proteome of a primate-adapted P. vivax strain; antigenic molecules able to bind to human reticulocytes have been characterised. Analysing the P. vivax VCG-1 strain proteome led to detecting 734 proteins, some of them essential in key steps for establishing merozoite invasion of target cells. Furthermore, 811 A. nancymaae primate erythrocyte components (vital Plasmodium hosts) were identified; 51 of them were integral membrane proteins, 7 described as Plasmodium receptors. The presence, transcription, expression and antigenicity of genes encoding three P. vivax molecules (PvARP, PvRBSA and PvGAMA) were identified. Particularly interesting was the finding that a higher percentage of PvRBSA and PvGAMA bound to reticulocytes abundantly expressing the CD71 receptor (CD71hi), thereby suggesting that these molecules could be participating in P. vivax merozoite preferential selection for human reticulocytes. This the first study in Colombia which has determined the protein composition of a primate-adapted P. vivax strain as well as A. nancymaae erythrocytes. More importantly, P. vivax molecules were characterised which appear to be suitable candidates for being evaluated as components of a vaccine against malaria caused by the parasite species.; [ES] La identificación y caracterización de proteínas que utilizan los merozoitos de Plasmodium para invadir a su célula hospedera, representan una estrategia importante para desarrollar un método de control contra estos parásitos. A pesar de ello, la investigación básica en P. vivax está retrasada por su difícil propagación in vitro, debido a la preferencia que tiene el parásito por invadir reticulocitos, los cuales se encuentran en escaso porcentaje en sangre periférica de humanos adultos (1-2%) y son difíciles de obtener con alta pureza, en suficiente cantidad y totalmente viables. Como consecuencia de lo anterior, el conocimiento del número de moléculas que expresa P. vivax y cuáles de ellas son candidatas para componer una vacuna, es escaso. En este estudio, se evaluó el proteoma de una cepa de P. vivax adaptada a primates y se caracterizaron moléculas antigénicas y con capacidad de adhesión a reticulocitos humanos. En el análisis del proteoma de la cepa VCG-1 de P. vivax, se detectaron 734 proteínas, algunas esenciales en los pasos clave para establecer la invasión del merozoito a su célula diana. Además, se identificaron 811 componentes de eritrocitos (hospederos vitales de Plasmodium) del primate A. nancymaae, de los cuales 51 son proteínas integrales de membrana, 7 descritas como receptores de Plasmodium. Por otro lado, se identificó la presencia, transcripción y expresión de los genes codificantes de tres moléculas de P. vivax: PvARP, PvRBSA y PvGAMA, así como su antigenicidad. De particular interés, se encontró que PvRBSA y PvGAMA se unen en mayor proporción a reticulocitos que expresan el receptor CD71 de forma abundante (CD71hi), lo que sugiere que estas moléculas pueden estar participando en la selección preferencial que tienen los merozoitos de P. vivax por los reticulocitos humanos. Este es el primer estudio en Colombia donde se determina la composición proteica de una cepa de P. vivax adaptada a primates, así como la de eritrocitos de A. nancymaae. Como resultado más importante, se caracterizaron moléculas de P. vivax que son candidatos idóneos a ser evaluados como componentes de una vacuna contra la malaria causada por esta especie parasitaria. Sun, 01 Jan 2017 00:00:00 GMT http://hdl.handle.net/10366/137110 2017-01-01T00:00:00Z