Estudio del efecto de las células madre mesenquimales sobre el segmento anterior del ojo en un modelo experimental de enfermedad de injerto contra huésped ocular

Abstract

[ES] Introducción: El trasplante alogénico de precursores hematopoyéticos representa la única posibilidad de curación para numerosos pacientes con hemopatías malignas. La complicación más frecuente es la Enfermedad de Injerto contra Huésped (EICH). El 40-90% de pacientes con EICH desarrolla Enfermedad de Injerto contra Huésped Ocular (EICHo), no se conoce con exactitud su fisiopatología, se caracteriza por un síndrome de ojo seco severo. Los tratamientos actuales son escasos e ineficaces. Las células stem mesenquimales (CSM) pueden convertirse en una alternativa para el tratamiento de la EICHo por sus propiedades inmunológicas y capacidad de diferenciación. Objetivos: Generación de un modelo animal de EICHo. Evaluar la distribución, caracterización y capacidad de diferenciación de CSM humanas inyectadas subconjuntivalmente en ratones sanos y en el modelo de EICHo. Métodos: Para generar el modelo murino de EICHo los ratones receptores BALB/C fueron sometidos a una irradiación corporal letal, después realizamos un trasplante de médula ósea y esplenocitos de ratones donantes C57BL/6. Caracterizamos y puntuamos las alteraciones macroscópicas oculares. Realizamos un estudio anatomopatológico de estructuras oculares. Obtuvimos CSM humanas de donantes sanos. La inyección de CSM humanas en ratones se realizó subconjuntivalmente. Realizamos estudios de Inmunohistoquímica de fluorescencia, Microscopía electrónica y Western-blot. Resultados: Los animales a los que se había generado EICHo presentaban signos clínicos y anatomopatológicos de EICH en párpados, glándula lagrimal, conjuntiva, córnea y limbo. Las CSM inyectadas subconjuntivalmente migran y se diferencian hacia células corneales y limbares, adquieren in vivo características ultraestructurales de células corneales. La migración es más evidente en ratones con EICHo. Conclusiones: Este modelo se podría establecer como modelo de EICHo. La superficie ocular es órgano diana de EICH. La inyección subconjuntival de CSM permite el injerto y migración de CSM hacia córnea y limbo. Las CSM tienen capacidad de diferenciación hacia células corneales, podría ser útil para el tratamiento de EICHo

[EN] Introduction: Allogeneic hematopoietic precursors represents the only chance of cure for many patients with hematological malignancies. The most common complication is graft versus host disease (GVHD). The 40-90% of patients with GVHD develops ocular Graft vs Host Disease Ocular, not exactly known pathophysiology, characterized by a severe dry eye syndrome. Current treatments are limited and ineffective. Mesenchymal stem cells (MSCs) can become an alternative for treating EICHo for their immunological properties and differentiation capacity. Objectives: Generation of an animal model of ocular GVHD. Evaluate distribution, characterization and differentiation capacity of human MSCs in healthy mice injected subconjunctivally and EICHo model. Methods To generate the murine model ocular GVHD recipient mice BALB / C were subjected to lethal total body irradiation, conducted after bone marrow transplantation from donor mice splenocytes and C57BL / 6. We characterize the macroscopic alterations and punctuate eye. We performed a histological study of ocular structures. Human MSCs obtained from healthy donors. Injection of human MSCs in mice was subconjunctivally. We fluorescence immunohistochemical studies, electron microscopy and Western blot. Results: The animals that had been generated ocular GVHD clinical signs and pathology of GVHD in eyelids, lacrimal gland, conjunctiva, cornea and limbus. The CSM injected subconjunctivally migrate and differentiate into corneal and limbal cells acquire in vivo corneal cell ultrastructural features. Migration is more evident in mice with ocular GVHD. Conclusions: This model could be established as ocular GVHD model. The ocular surface is GvHD target organs. Subconjunctival injection of CSM allows migration of the graft and CSM to cornea and limbus. MSCs have the capacity to differentiate into corneal cells, could be useful for the treatment of Ocular Graft vs. Host Disease