Tesis por compendio de publicaciones
[ES]Con el fin de mantenerse y propagarse en los vasos sanguíneos, muchos patógenos requieren de adaptaciones para evitar la coagulación de la sangre a través de la interacción con el sistema fibrinolítico de sus hospedadores. Uno de sus componentes clave es el plasminógeno, una glicoproteína que tras su activación se convierte en plasmina, que es la serina proteasa encargada de degradar los coágulos de fibrina. Dirofilaria immitis es el agente causante de la dirofilariosis cardiopulmonar canina y felina, enfermedad crónica que se caracteriza por la persistencia de sus vermes adultos en el sistema vascular de su hospedador. Dada su capacidad de supervivencia y el hecho de que cuando mueren los vermes se producen tromboembolismos de gravedad, nuestra primera hipótesis fue que el parásito controla y modifica su hábitat sanguíneo generando un estado neto antitrombótico mediante la utilización de productos profibrinolíticos. Por otra parte, la supuesta activación del sistema fibrinolítico a largo plazo por parte del parásito podría generar una sobreproducción de plasmina. Este fenómeno ha sido relacionado en otros contextos con situaciones patológicas graves que incluyen proliferación y migración de las células de la pared arterial, así como destrucción de la matriz extracelular. Estos mecanismos son similares a los que se producen durante el desarrollo de la endarteritis proliferativa, proceso hiperplásico de la pared arterial clave en el cuadro general de la patología de la dirofilariosis cardiopulmonar. Por ello, nuestra segunda hipótesis fue que la sobreactivación de la ruta fibrinolítica por parte de D. immitis estaría directamente relacionada con la aparición de dichos procesos patológicos en la pared vascular de los animales afectados.
Los resultados de la presente Tesis Doctoral demuestran que D. immitis es capaz de activar el sistema fibrinolítico de su hospedador mediante la acción conjunta de sus antígenos excretores/secretores y de superficie. Esto podría ser utilizado por el parásito para desplazar el equilibrio fibrinolítico hacia la generación de plasmina, lo que supondría un mecanismo de supervivencia para el parásito al controlar la formación de coágulos en su hábitat intravascular inmediato. Adicionalmente, se identificaron 10 y 11 proteínas fijadoras de plasminógeno en ambos extractos parasitarios. De ellas, se produjeron en su forma recombinante la actina, fructosa-bifosfato aldolasa, gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa y galectina, demostrando individualmente sus propiedades profibrinolíticas. Todas ellas son capaces de fijar plasminógeno, potenciar la generación de plasmina, estimular la expresión de activadores fibrinolíticos en cultivos de células endoteliales caninas y se localizan en la interfase D. immitis/hospedador.
Por otra parte, los datos demuestran que la plasmina,producto de la activación fibrinolítica causada por los antígenos de D. immitis, participa en la generación de los procesos patológicos descritos en la aparición de la endarteritis proliferativa en la dirofilariosis cardiopulmonar. Esto incluye la proliferación y migración de las células de la pared arterial, así como la degradación de la matriz extracelular, demostrándose estos hechos mediante la utilización tanto de los antígenos excretores/secretores del parásito, como de las dos proteínas con mayor capacidad profibrinolítica entre las estudiadas (actina y fructosa-bifosfato aldolasa) en un modelo in vitro de células endoteliales y musculares lisas de perro.
Los resultados obtenidos contribuyen al conocimiento de una parte muy compleja de las relaciones parásito/hospedador a nivel molecular en la dirofilariosis cardiopulmonar, mostrando por primera vez cómo un proceso relacionado con la supervivencia del parásito puede desencadenar mecanismos patogénicos de gran importancia. Además, Puesto que la capacidad para unir plasminógeno y potenciar la generación de plasmina ha sido demostrada en proteínas de muchos patógenos y debido al alto grado de conservación evolutiva de algunos de los antígenos estudiados, mecanismos similares podrían ocurrir en otras infecciones provocadas por patógenos sanguíneos que desarrollen procesos crónicos.
