Efecto de las células mesenquimales sobre el segmento posterior del ojo en un modelo experimental de enfermedad de injerto contra huesped ocular

Abstract

[ES] La Enfermedad de Injerto contra Huésped (EICH), es una complicación, que ocurre en pacientes sometidos a un trasplante alogénico. Entre un 40-90% de los pacientes con EICH presentan afectación ocular, caracterizada principalmente por un síndrome de ojo seco severo. En un 12,8% de los pacientes sometidos a trasplantes alogénicos aparecen complicaciones del segmento posterior del ojo. No se conoce con exactitud si son debidas a la EICH ocular (EICHo) o a otras causas, como la irradiación corporal total (TBI) o el uso de ciclosporina. Por otro lado, se ha visto que el uso de células stem mesenquimales (CSM) extraídas de la médula ósea (MO) puede convertirse en una alternativa para el tratamiento de la afectación corneal en la EICHo, pero es importante conocer si estas células se restringen a esta localización o migran hacia la retina, lo que podría ser un factor de riesgo en el tratamiento de la EICHo. Los objetivos de esta tesis son: evaluar, en un modelo animal de EICHo, la posible afectación del segmento posterior del ojo debido a la EICHo, la TBI o al trasplante de medula ósea y analizar si las CSM humanas inyectadas a nivel subconjuntival son capaces de migrar a la retina y afectar a la misma. Para generar el modelo animal de EICHo los ratones receptores BALB/C (H2d) fueron sometidos a una TBI y después realizamos un trasplante de médula ósea y esplenocitos de ratones donantes C57BL/6. Caracterizamos y puntuamos las alteraciones macroscópicas oculares. Realizamos un estudio de la osmolaridad de la película lagrimal. Obtuvimos CSM humanas de donantes sanos y se inyectaron subconjuntivalmente en ratones. Por último, realizamos estudios de inmunohistoquímica de fluorescencia en las retinas. Los animales a los que se les había generado EICHo presentaban signos clínicos de EICH en párpados, conjuntiva y córnea, asociado a un aumento de osmolaridad de la película lagrimal. No se encontraron signos de inflamación y apoptosis a nivel retiniano, ni alteraciones en células neurales, astrocitos y células de Müller, ni vasculares que se puedan atribuir a la EICHo. Sin embargo, existe un aumento de la población de la microglía y un cambio en su morfología que se podría atribuir a los efectos de la TBI y del trasplante de MO. Por otra parte, no hemos localizado migración de CSM hacia la retina tras su inyección por vía subconjuntival. La inyección subconjuntival de CSM es una opción segura para el tratamiento de la EICHo a nivel de la córnea ya que se restringen a esta localización y no migran hacia la retina. Las alteraciones en las poblaciones neuronales y en la vascularización de la retina en la EICHo son inexistentes o muy leves, como para ser capaces de atraer a las CSM hacia ella.