Análisis del perfil de expresión de microARN en pacientes con candidemia

Abstract

[ES]La candidemia representa un problema sanitario de relevancia creciente en el ámbito nosocomial, con una alta carga de morbimortalidad pese a los avances en el campo diagnóstico y terapéutico. Para intentar mejorar la comprensión de la fisiopatología de esta enfermedad y poder realizar avances en el manejo de la misma, el objetivo de nuestro trabajo fue determinar el perfil de expresión de los microARN en pacientes con candidemia por C. albicans y candidemia por otras especies de Candida. A partir de un registro epidemiológico de 244 casos de candidemia diagnosticados en pacientes adultos en el Hospital Universitario de Salamanca, se han reclutado 20 casos y 22 controles. Tras la obtención del consentimiento informado, se han recogido muestras de sangre en tubos específicos para la conservación del ARN y el posterior análisis de los microARN en dos etapas, mediante secuenciación génica masiva y PCR cuantitativa. Como resultados principales, los ensayos de secuenciación génica masiva han llevado a la identificación de 7 microARN diferencialmente expresados en las distintas comparaciones: miR 99b, miR-125a, miR-144, miR-5690, miR-584, let-7a, miR-223. Estos resultados se han posteriormente comprobado mediante PCR cuantitativa. Las dos técnicas han mostrado concordancia para 3 de los microARN mencionados: miR-99b y miR-125a resultaban significativamente sobreexpresados en candidemia por C. albicans, en comparación con casos por otras especies de Candida y con controles sin infección; miR-144 estaba infraexpresado en la candidemia por C. no albicans, respecto a casos por C. albicans y a controles sin infección. En base a las evidencias procedentes de otros trabajos y de forma exploratoria, se puede postular un papel para estos microARN en la respuesta inmunitaria innata a los hongos. En particular, la sobreexpresión de miR-99b y miR-125a encontrada en candidemia por C. albicans podría representar, como hipótesis, un mecanismo para evadir la respuesta inmunitaria del hospedador. Estos resultados podrían tener influencia en la práctica clínica, en caso de confirmarse y validarse en otras cohortes experimentales. La medición de los microARN podría contribuir a aumentar la sensibilidad y acortar el tiempo de diagnóstico. Además, la diferencia de expresión entre C. albicans y C. no albicans es una indudable ventaja, ya que permitiría predecir en base a ello la etiología de la candidemia y aumentar la tasa de acierto terapéutico en las fases precoces de la infección. Se ha evaluado también la correlación de los microARN identificados con los marcadores inflamatorios y con la evolución clínica. No se ha identificado un patrón claro de correlación entre marcadores inflamatorios y microARN, lo que nos permite descartar que la expresión diferencial de los miARN sea únicamente marcador de la presencia de un proceso inflamatorio. Por otro lado, no se han encontrado diferencias estadísticamente significativas en la expresión de estos microARN en función de la evolución clínica, por lo que no podemos extraer conclusiones sobre su valor pronóstico en pacientes con candidemia. Este es el primer trabajo que evalúa el perfil de expresión de los miARN en pacientes con candidemia y, de acuerdo a nuestros resultados, miR-99b y miR-125a resultan sobreexpresados en la candidemia por C. albicans, mientras que miR-144 se encuentra infraexpresado en los casos con infección por C. no albicans.