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Título
Estudio del potencial terapéutico de la herramienta de edición genómica CRISPR/Cas9 en la leucemia mieloide crónica
Autor(es)
Director(es)
Materia
Tesis y disertaciones académicas
Universidad de Salamanca (España)
Tesis Doctoral
Academic dissertations
tratamiento
Clasificación UNESCO
6310.03 Enfermedad
Fecha de publicación
2022
Resumen
[ES] La leucemia mieloide crónica (LMC) es una neoplasia mieloproliferativa que tiene
su origen en el compartimento de las células madre hematopoyéticas (CMH). Con una
causa citogenética muy marcada, la LMC surge a partir de la traslocación reciproca
t(9;22)(q34;11.2), que resulta en la formación del denominado cromosoma filadelfia (Ph),
el cual codifica para el oncogén de fusión BCR/ABL. Es la oncoproteína p210 BCR/ABL,
y en particular, su actividad tirosina quinasa (TK) constitutiva la que impulsa y explica
toda la patogenia de la LMC. Actualmente, el tratamiento estándar para la enfermedad
son los inhibidores de la tirosina quinasa (TKIs), cuya irrupción en la rutina clínica
cambió profundamente el panorama terapéutico de la enfermedad, ofreciendo unas tasas
de éxito sin precedentes. Sin embargo, la necesidad de administración crónica, los efectos
secundarios derivados y la aparición de resistencias a estos fármacos, hacen que hasta un
33% de los pacientes finalmente requieran de otros tratamientos alternativos.
En este escenario de búsqueda de nuevas terapias, el aspecto monogénico de la
enfermedad, unido a la viabilidad de las terapias ex vivo para los trastornos
hematológicos, hacen de la LMC una excelente candidata para las estrategias de terapia
génica. La capacidad de abolir cualquier secuencia codificante mediante el sistema de
edición CRISPR/Cas9 ofrece una poderosa oportunidad terapéutica para los pacientes con
LMC. En este sentido, la elección de un sistema de edición efectivo en la generación de
alelos nulos es crucial para el éxito de la terapia. Por ello, en el presente trabajo se ha
evaluado la efectividad de eliminación del gen BCR/ABL de diferentes estrategias basadas
en el sistema CRISPR/Cas9.
Una vez obtenido un eficiente sistema de edición, basado en la generación de
deleciones específicas en el dominio TK de ABL, se analizó su potencial terapéutico,
utilizando para ello un modelo murino de LMC y ensayos de trasplantes ortotópicos de
células madre leucémicas (CML) de pacientes con LMC. En ambos sistemas, las CML
editadas fueron capaces de restaurar una hematopoyesis fisiológica en el nicho medular
de ratones inmunodeficientes NSG, proporcionando un beneficio terapéutico
significativo. Sin embargo, y pese a los prometedores resultados obtenidos, lograr una
cura definitiva de la enfermedad pasa por garantizar la inexistencia de eventos residuales
sin editar. Para ello, se desarrolló una nueva aproximación, que combina el sistema
CRISPR/Cas9 con una estrategia de trampa génica (CRISPR-Trap) y permite la selección específica de las células editadas. El sistema CRISPR-Trap demostró su efectividad al
seleccionar adecuadamente las células en las que el oncogén BCR/ABL había sido
eliminado mediante la expresión de una proteína fluorescente, resultando en una
significativa inhibición tumoral in vitro e in vivo.
De esta forma, y aunque serán necesarios nuevos estudios para aumentar la
seguridad y eficiencia del proceso de edición, todos estos resultados han demostrado el
potencial de una estrategia de terapia génica, basada en la eliminación genómica de
BCR/ABL en las CMH, como tratamiento definitivo para la leucemia mieloide crónica.
Del mismo modo, abre la puerta al uso de esta tecnología como opción terapéutica para
la eliminación de genes implicados en diferentes patologías hematológicas.
URI
DOI
10.14201/gredos.152593
Colecciones