C3G contributes to platelet activation and aggregation by regulating major signaling pathways

Abstract

[SPA]C3G es un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF, por sus siglas en inglés) para las GTPasas Rap, entre las cuales la isoforma Rap1b es una proteína esencial en la biología de las plaquetas. Utilizando modelos de ratones transgénicos con sobreexpresión específica en plaquetas de C3G (tgC3G) o del mutante C3GΔCat (tgC3GΔCat, carente del dominio catalítico), así como un modelo de ratón con eliminación específica de C3G en plaquetas (C3G-KO), en este trabajo hemos demostrado que C3G contribuye a la activación y agregación plaquetaria, tanto in vitro como in vivo, a través de la activación de Rap1b. Además, hemos explorado la contribución de la vía C3G-Rap1b a las rutas de señalización plaquetarias desencadenadas por trombina, PMA o ADP en el modelo de ratón transgénico referido (tgC3G) mediante el uso de una batería de inhibidores específicos. Nuestros resultados indican que la proteína C3G plaquetaria es fosforilada en Tyr504 mediante un mecanismo que involucra a la ruta de PKC-Src. Esta fosforilación está regulada positivamente por las ERK/MAPK a través de la inhibición de la fosfatasa de tirosina Shp2. Además, C3G participa en la vía ADP-P2Y12-PI3K-Rap1b y es un mediador de la actividad de la ruta trombina-TXA2. Sin embargo, C3G inhibe la síntesis de TXA2 mediante la regulación de cPLA2. En conjunto, nuestros datos revelan un papel clave de C3G en las principales vías que conducen a la activación y agregación plaquetaria a través de la regulación de Rap1b.