Mechanisms of autoregulation of C3G, activator of the GTPase Rap1, and its catalytic deregulation in lymphomas

Abstract

[SPA]C3G es un factor de intercambio de nucleótidos de guanina (GEF) que regula la adhesión y migración celular mediante la activación de la GTPasa Rap1. La actividad GEF de C3G es estimulada por las proteínas adaptadoras Crk y CrkL, así como por la fosforilación de tirosinas. En este trabajo, se describen los mecanismos de autoinhibición y activación de C3G. Específicamente, encontramos que dos interacciones intramoleculares regulan la actividad de C3G. Primero, una región autoinhibitoria (AIR) dentro del dominio central de C3G se une y bloquea el dominio catalítico Cdc25H. Segundo, la unión del dominio N-terminal de la proteína al motivo REM (“Ras exchange Motif”) es necesaria para su actividad GEF. CrkL activó C3G desplazando la interacción AIR/Cdc25HD. Dos mutaciones missense en el AIR, encontradas en linfomas no Hodgkin, Y554H y M555K, interrumpieron el mecanismo autoinhibitorio. La expresión de C3G-Y554H o C3G-M555K en células pro–B Ba/F3 causó activación constitutiva de Rap1 y, consecuentemente, de la integrina LFA-1. Nuestros hallazgos sugieren que la activación sostenida de Rap1 por C3G desregulada podría promover la progresión de linfomas y que el diseño de terapias dirigidas a C3G podría tratar estas malignidades.