Quantification of immune dysregulation by next-generation polymerase chain reaction to improve sepsis diagnosis in surgical patients

Abstract

[ES]Objetivos: Cuantificar la disfunción inmunológica en pacientes quirúrgicos con presencia/ausencia de sepsis mediante análisis transcriptómico de reacción en cadena de la polimerasa digital en gotas (ddPCR). El estudio también busca evaluar este enfoque para mejorar la identificación de la sepsis en estos pacientes.

Antecedentes: La desregulación inmunitaria es un evento central en la sepsis. La cuantificación de la expresión de genes inmunológicos que participan en la patogénesis de la sepsis podría representar una nueva vía para mejorar su diagnóstico.

Métodos: Se cuantificó la expresión de 6 genes de proteasa de neutrófilos (MMP8, OLFM4, LCN2/NGAL, LTF, PRTN3, MPO) y de 5 genes implicados en la sinapsis inmunológica (HLA-DRA, CD40LG, CD3E, CD28, ICOS) en sangre de 101 pacientes quirúrgicos con sepsis, 53 pacientes quirúrgicos no infectados y 16 donantes de sangre mediante ddPCR. Se emplearon áreas bajo las curvas características operativas del receptor (AUROC) y análisis de regresión multivariante para evaluar genes individuales y ratios génicos con el fin de identificar sepsis, en comparación con procalcitonina.

Resultados: Sobreexpresión de genes de la proteasa de neutrófilos inducida por sepsis y expresión disminuida de genes de sinapsis inmunológica. MMP8/HLA-DRA y LCN2/HLA-DRA superaron a la procalcitonina en la diferenciación entre pacientes con sepsis y controles quirúrgicos en el análisis AUROC: LCN2/HLA-DRA: 0,90 (0,85-0,96), MMP8/HLA-DRA: 0,89 (0,84-0,95), procalcitonina: 0,80 (0,73-0,88) (AUROC, intervalo de confianza del 95%), y también en el análisis multivariante: LCN2/HLA-DRA: 8,57 (2,25-32,62); MMP8/HLA-DRA: 8,03 (2,10-30,76), procalcitonina: 4,20 (1,15-15,43) [odds ratio (IC del 95%)]. Los niveles de expresión génica de HLA-DRA fueron un marcador independiente de mortalidad hospitalaria.

Conclusiones: La cuantificación de los ratios transcriptómicos MMP8/HLA-DRA y LCN2/HLA-DRA mediante ddPCR es un enfoque prometedor para mejorar el diagnóstico de sepsis en pacientes quirúrgicos.