Los decaimientos de la vid en Castilla y León: aislamiento, caracterización y métodos de control de las enfermedades de la madera de la vid (Vitis Vinifera)

Abstract

Los decaimientos de la vid son un conjunto de enfermedades producidas por hongos que provocan la podredumbre de la madera y consecuentemente la pérdida de vigor o incluso la muerte prematura de la planta. El objetivo de este trabajo fue el estudio de estas enfermedades, y sus hongos asociados, en Castilla y León. Para ello, durante los años 2003-2007, se realizó un seguimiento en 18 parcelas de vid de 6 denominaciones de origen de Castilla y León, tomando muestras de cada una de ellas para su posterior análisis en el laboratorio. En todas las denominaciones de origen estudiadas se produjo un aumento de la incidencia de estas enfermedades, pasando de un 3% de incidencia en el año 2003 a un 10% en 2007. De las plantas analizadas se aislaron e identificaron mayoritariamente: Phaeoacremonium aleophilum, Phaeomoniella chlamydospora, Botryosphaeriaceae (principalmente Diplodia seriata, Diplodia mutila, Botryosphaeria dothidea y Neofusicoccum parvum) y Cylindrocarpon spp. La secuenciación del ADN ribosómico de los aislados identificados como Cylindrocarpon spp. puso de manifiesto la existencia de: N. macrodidyma, C. liriodendri y C. olidum. Teniendo en cuenta que P. chlamydospora fue una de las especies aisladas con mayor frecuencia, se estudió la variabilidad genética de 35 aislados de P. chlamydospora mediante RAPDs y por comparación de las secuencias de tres regiones del genoma: ITS, ?-tubulina y factor de elongación 1?, confirmándose la escasa variabilidad genética existente entre los aislados de esta especie. A partir de las secuencias de la región ITS se diseñó un sistema de identificación mediante RTi-PCR que permite detectar hasta 1 fg de ADN o 1 espora de P. chlamydospora. Finalmente se ensayó la actividad de 3 fungicidas (Escudo®, carbendazima y flusilazol) sobre 14 especies de hongos asociadas a estas enfermedades observándose que en general el efecto producido es fungistático y no fungicida.

Grapevine declines are a set of diseases caused by fungi that produce premature decline and dieback of grapevines. The aim of this work was the study of these diseases and their associated fungi in Castilla y León. During the years 2003-2007, a follow-up was realized in 18 vineyards of 6 Geographic Appellations of Castilla y León, taking samples for their later analysis in the laboratory. In all Geographic Appellations studied there was an increase of grapevine declines from 3% in 2003 until 10% in 2007. From the samples analyzed were isolated and identified Phaeoacremonium aleophilum, Phaeomoniella chlamydospora, Botryosphaeriaceae (mainly Diplodia seriata, Diplodia mutila, Botryosphaeria dothidea and Neofusicoccum parvum) and Cylindrocarpon spp. The ribosomal DNA sequences of Cylindrocarpon spp. revealed the presence of N. macrodidyma, C. liriodendri y C. olidum.The most frequently specie isolated was P. chlamydospora, in order that, the variability of 35 strains of P. chlamydospora was studied with RAPDs and sequence comparisons of ITS, ?-tubulina and Elongation Factor 1?, being confirmed that P. chlamydospora is a specie with few variability among different strains. An identification system based in RealTime- PCR to detect P. chlamydospora was designed in base of ITS sequences. The system detect until 1 fg of DNA or 1 spore of P. chlamydospora.Finally the effect of three fungicides (Escudo®, carbendazim y flusilazol) was studied in 14 fungal species associated with grapevine decline, the study revealed that these products had a fungistatic effect mainly.