Resumen de tesis. Desarrollo de nuevas moléculas vectorizadas con ácidos biliares mediante cicloadición 1,3-dipolar para la evaluación de la función hepatobiliar y el tratamiento de cáncer hepático

Abstract

[ES] Una de las estrategias utilizadas en el diseño de fármacos consiste en vectorizar un compuesto de conocida actividad farmacológica o de diagnóstico mediante conjugación con otra molécula que le facilite su acceso de la forma más selectiva posible al tejido-diana. De esta manera, en el caso de la terapia antitumoral se pretende aumentar la llegada del fármaco al interior de las células cancerosas, limitando al máximo su acumulación en tejidos sanos y con ello reduciendo sus efectos secundarios. Se plantan dos objetivos: Objetivo 1: Obtención y evaluación in vitro de una familia de compuestos denominados BATKIs (Bile Acid-Tyrosine Kinase Inhibitor) con propiedades organotrópicas y antitumorales. Objetivo 2: Obtención y evaluación in vitro e in vivo de moléculas con vectorización hepatobiliar mediante ABs y portadores de un grupo con característica de fluorescencia en el infrarrojo cercano que denominaremos NIRBAD (Near Infrared Radiation Bile Acid Derivative) Con ello, Se ha sintetizado, purificado y caracterizado químicamente una nueva familia de derivados de ácidos biliares (AB) unidos a moléculas farmacológicamente activas que se utilizan actualmente en el tratamiento del cáncer de hígado (sorafenib y erlotinib) debido a que su actividad como inhibidores de receptores con actividad tirosina quinasa (TKI). Esta nueva familia denominada BATKI se ha diseñado a partir de una estrategia de conjugación entre las moléculas de interés que conlleva la formación de triazoles como fragmento de conexión entre ellas. Los BATKIs han demostrado actividad antiproliferativa de forma dosis-dependiente en modelos vectorizados con transportadores enterohepáticos y de hepatocarcinoma (HCC) y colangiocarcinoma humano (CCA), reduciendo la viabilidad celular con una potencia similar al fármaco del que derivan. En experimentos de 72 horas, su posible capacidad de vectorización se vio enmascarada por otros procesos de captación inespecífica. Sin embargo, en ensayos de citotoxicidad en periodos de exposición de 6 horas los BATKIs mostraron una actividad antitumoral superior en las líneas de HCC que sobreexpresaban transportadores de ABs, lo que revela su capacidad de vectorización. Los estudios de captación realizados utilizando la citometría de flujo para identificar los posibles transportadores de ABs que podrían ser la vía de entrada de los compuestos sintetizados, mostraron que moléculas derivadas de ABs funcionalizadas con un fluoróforo en la cadena lateral y, por tanto, con una estructura similar a los BATKIs como es la colilglicilamidofluoresceína (CgamF), pueden ser sustratos de OATP1B3. Los resultados obtenidos en estudios de docking fueron concordantes con los obtenidos en ensayos biológicos, ya que las energías de unión en el complejo enzima- sustrato entre diferentes TKRs y los compuestos BATKI o su subproducto de hidrólisis son muy similares a las encontradas por cristalografía de RX del TKI del que derivan.