Estudio de la estabilidad de la combinación de anticuerpos de los tubos TCD4 y TCD8 para su uso en el estudio de la monitorización del sistema inmune mediante técnicas de citometría de flujo multiparamétrica

Abstract

El reactivo Brilliant Stain Buffer (BSB), diseñado para reducir artefactos en ensayos de citometría de flujo (CMF), causados por interacciones entre fluorocromos conjugados a anticuerpos monoclonales, podría conferir mayor estabilidad a los fluorocromos, y facilitar la preparación técnica e interpretación de resultados. Objetivos: Evaluar la estabilidad de los cócteles de anticuerpos preparados con antelación, para el análisis de poblaciones leucocitarias en sangre periférica (SP) por CMF y el beneficio potencial del BSB para preservar el cóctel en el tiempo. Métodos: Se procesaron muestras de SP por CMF utilizando dos paneles (TCD4 y TCD8) con y sin BSB, utilizando los cócteles preparados el día de su uso, 24h y 5 días antes de su uso. La estabilidad de los anticuerpos se comparó mediante el Stain Index (SI). Resultados: Se observó cierta variabilidad en la estabilidad de algunos fluorocromos con el paso del tiempo, principalmente en el panel TCD8, aunque el SI no varió sustancialmente (vs control sin BSB). En general, no había diferencias entre los tubos con y sin BSB. Conclusiones: La antigüedad del cóctel pre-preparado de anticuerpos no perjudica la estabilidad del cóctel y el uso de BSB no parece afectar de forma negativa a la estabilidad del cóctel.